中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2012年
9期
48-54
,共7页
齐金凤%孙权%常金华%KhalidHussain%林凤
齊金鳳%孫權%常金華%KhalidHussain%林鳳
제금봉%손권%상금화%KhalidHussain%림봉
高梁%抗蚜基因%抑制性消减杂交%序列分析
高樑%抗蚜基因%抑製性消減雜交%序列分析
고량%항아기인%억제성소감잡교%서렬분석
为了从分子水平上解析高粱广谱抗蚜基因在高粱与蚜虫互作中的分子遗传基础和作用机理,为发掘并利用抗蚜基因提供可靠的信息支持.以高粱抗蚜品种‘河农16’与感蚜品种‘千三’为实验材料,构建抑制性消减杂交(SSH)文库,使差异抗蚜基因得到富集,对有效差异基因序列进行序列分析.随机挑选SSH文库中的200个阳性克隆进行测序和分析,得到18条ORF序列,同NCBI数据库进行Blastx在线比对和相似性分析,发现这些序列与叶绿体放氧增强相关蛋白、腺苷酸环化相关蛋白、核糖体蛋白、衰老联合蛋白高度相关.不具有ORF的序列,通过NCBI利用Blastn和Blastx进行序列同源性比对和相似性分析,发现66条与已知多种植物抗病序列有较高的同源性,如核糖体蛋白、转运膜蛋白、NBS-LRR抗病蛋白家族-1、锌指蛋白、ATP合酶、NADH脱氢酶、反转录转座子、腺苷酸环化相关蛋白、bZIP转录因子等,还有部分序列与高粱抗条锈病基因高度相似.这些同源基因涉及次生代谢、能量代谢、膜运输、细胞信号传递和转录调控等多种过程.成功构建高粱抗蚜基因SSH文库,表明SSH技术在高粱抗蚜机制研究中具有可行性,研究结果为进一步高梁抗蚜基因功能研究奠定基础.
為瞭從分子水平上解析高粱廣譜抗蚜基因在高粱與蚜蟲互作中的分子遺傳基礎和作用機理,為髮掘併利用抗蚜基因提供可靠的信息支持.以高粱抗蚜品種‘河農16’與感蚜品種‘韆三’為實驗材料,構建抑製性消減雜交(SSH)文庫,使差異抗蚜基因得到富集,對有效差異基因序列進行序列分析.隨機挑選SSH文庫中的200箇暘性剋隆進行測序和分析,得到18條ORF序列,同NCBI數據庫進行Blastx在線比對和相似性分析,髮現這些序列與葉綠體放氧增彊相關蛋白、腺苷痠環化相關蛋白、覈糖體蛋白、衰老聯閤蛋白高度相關.不具有ORF的序列,通過NCBI利用Blastn和Blastx進行序列同源性比對和相似性分析,髮現66條與已知多種植物抗病序列有較高的同源性,如覈糖體蛋白、轉運膜蛋白、NBS-LRR抗病蛋白傢族-1、鋅指蛋白、ATP閤酶、NADH脫氫酶、反轉錄轉座子、腺苷痠環化相關蛋白、bZIP轉錄因子等,還有部分序列與高粱抗條鏽病基因高度相似.這些同源基因涉及次生代謝、能量代謝、膜運輸、細胞信號傳遞和轉錄調控等多種過程.成功構建高粱抗蚜基因SSH文庫,錶明SSH技術在高粱抗蚜機製研究中具有可行性,研究結果為進一步高樑抗蚜基因功能研究奠定基礎.
위료종분자수평상해석고량엄보항아기인재고량여아충호작중적분자유전기출화작용궤리,위발굴병이용항아기인제공가고적신식지지.이고량항아품충‘하농16’여감아품충‘천삼’위실험재료,구건억제성소감잡교(SSH)문고,사차이항아기인득도부집,대유효차이기인서렬진행서렬분석.수궤도선SSH문고중적200개양성극륭진행측서화분석,득도18조ORF서렬,동NCBI수거고진행Blastx재선비대화상사성분석,발현저사서렬여협록체방양증강상관단백、선감산배화상관단백、핵당체단백、쇠로연합단백고도상관.불구유ORF적서렬,통과NCBI이용Blastn화Blastx진행서렬동원성비대화상사성분석,발현66조여이지다충식물항병서렬유교고적동원성,여핵당체단백、전운막단백、NBS-LRR항병단백가족-1、자지단백、ATP합매、NADH탈경매、반전록전좌자、선감산배화상관단백、bZIP전록인자등,환유부분서렬여고량항조수병기인고도상사.저사동원기인섭급차생대사、능량대사、막운수、세포신호전체화전록조공등다충과정.성공구건고량항아기인SSH문고,표명SSH기술재고량항아궤제연구중구유가행성,연구결과위진일보고량항아기인공능연구전정기출.
