微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2005年
5期
753-756
,共4页
猪链球菌2型%纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白%融合表达%纤连蛋白结合部位
豬鏈毬菌2型%纖連蛋白/血纖蛋白原結閤蛋白%融閤錶達%纖連蛋白結閤部位
저련구균2형%섬련단백/혈섬단백원결합단백%융합표체%섬련단백결합부위
根据猪链球菌2型江苏分离株HA9801的fbps基因序列,设计合成不同的引物,用含全长fbps的pMD-T-FBPS质粒为模板,通过PCR技术,扩增不同片段fbps,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体pET-32a(+),构建分别表达全长7～82、7～165和87～320氨基酸FBPS的重组表达质粒pFBPS、pFBPS(7～82)、pFBPS(7～165)和pFBPS(87～320);将重组质粒转化大肠杆菌BL 21(DE)株,经IPTG诱导,表达rFBPS(7～82)、rFBPS(7～165)、rFBPS(87～320)和rFBPS(全长),分子量分别为29、34、42及83kD的融合蛋白.配基亲和Western blot试验表明,表达的融合蛋白除rFBPS(7～82)外,均可与人纤连蛋白(Fn)结合,由此可以推断SS2的纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(FBPS)N端87～165氨基酸区域为具有结合活性的线性部位.
根據豬鏈毬菌2型江囌分離株HA9801的fbps基因序列,設計閤成不同的引物,用含全長fbps的pMD-T-FBPS質粒為模闆,通過PCR技術,擴增不同片段fbps,併按正確的閱讀框架定嚮剋隆到錶達載體pET-32a(+),構建分彆錶達全長7～82、7～165和87～320氨基痠FBPS的重組錶達質粒pFBPS、pFBPS(7～82)、pFBPS(7～165)和pFBPS(87～320);將重組質粒轉化大腸桿菌BL 21(DE)株,經IPTG誘導,錶達rFBPS(7～82)、rFBPS(7～165)、rFBPS(87～320)和rFBPS(全長),分子量分彆為29、34、42及83kD的融閤蛋白.配基親和Western blot試驗錶明,錶達的融閤蛋白除rFBPS(7～82)外,均可與人纖連蛋白(Fn)結閤,由此可以推斷SS2的纖連蛋白/血纖蛋白原結閤蛋白(FBPS)N耑87～165氨基痠區域為具有結閤活性的線性部位.
근거저련구균2형강소분리주HA9801적fbps기인서렬,설계합성불동적인물,용함전장fbps적pMD-T-FBPS질립위모판,통과PCR기술,확증불동편단fbps,병안정학적열독광가정향극륭도표체재체pET-32a(+),구건분별표체전장7～82、7～165화87～320안기산FBPS적중조표체질립pFBPS、pFBPS(7～82)、pFBPS(7～165)화pFBPS(87～320);장중조질립전화대장간균BL 21(DE)주,경IPTG유도,표체rFBPS(7～82)、rFBPS(7～165)、rFBPS(87～320)화rFBPS(전장),분자량분별위29、34、42급83kD적융합단백.배기친화Western blot시험표명,표체적융합단백제rFBPS(7～82)외,균가여인섬련단백(Fn)결합,유차가이추단SS2적섬련단백/혈섬단백원결합단백(FBPS)N단87～165안기산구역위구유결합활성적선성부위.
