细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2005年
4期
476-479
,共4页
段小莉%王百忍%杨唐斌%于海明%朱正华%徐震%王曦%王家同
段小莉%王百忍%楊唐斌%于海明%硃正華%徐震%王晞%王傢同
단소리%왕백인%양당빈%우해명%주정화%서진%왕희%왕가동
促肾上腺皮质激素释放因子%多克隆抗体%单克隆抗体%脑%睡眠剥夺
促腎上腺皮質激素釋放因子%多剋隆抗體%單剋隆抗體%腦%睡眠剝奪
촉신상선피질격소석방인자%다극륭항체%단극륭항체%뇌%수면박탈
目的:制备并鉴定促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)的单克隆抗体(mAb)和多克隆抗体(pAb), 并研究其在睡眠剥夺模型大鼠脑内的变化.方法: 用CRF分别与牛血清白蛋白(BSA)和牛甲状腺球蛋白(BTG)交联, 制成免疫原和检测用的包被抗原.将BSA-CRF分别免疫新西兰大白兔和雌性BALB/c小鼠, 制备其mAb和pAb, 经 ELISA和免疫细胞化学染色等方法进行鉴定, 并用所获抗体观察CRF在正常成年大鼠睡眠剥夺48 h后脑内的变化.结果: 所获得的CRF pAb和9株mAb具有较高的效价、特异性及亲和力.其中, pAb和2株mAb(1D10, 2F4)可用于免疫组织化学染色.睡眠剥夺48 h后下丘脑室旁核、杏仁核中央亚核、终纹状核卵圆亚核等核团高表达CRF样阳性产物, 而对照组相关核团内则极少或未出现.结论: ①成功地获得可用于免疫组化染色的CRF mAb和pAb.②提示CRF在中枢神经系统对睡眠剥夺造成的应激反应的调节过程中具有重要的意义.下丘脑室旁核、杏仁中央核和终纹床核是脑内相关调节环路的一部分.
目的:製備併鑒定促腎上腺皮質激素釋放因子(CRF)的單剋隆抗體(mAb)和多剋隆抗體(pAb), 併研究其在睡眠剝奪模型大鼠腦內的變化.方法: 用CRF分彆與牛血清白蛋白(BSA)和牛甲狀腺毬蛋白(BTG)交聯, 製成免疫原和檢測用的包被抗原.將BSA-CRF分彆免疫新西蘭大白兔和雌性BALB/c小鼠, 製備其mAb和pAb, 經 ELISA和免疫細胞化學染色等方法進行鑒定, 併用所穫抗體觀察CRF在正常成年大鼠睡眠剝奪48 h後腦內的變化.結果: 所穫得的CRF pAb和9株mAb具有較高的效價、特異性及親和力.其中, pAb和2株mAb(1D10, 2F4)可用于免疫組織化學染色.睡眠剝奪48 h後下丘腦室徬覈、杏仁覈中央亞覈、終紋狀覈卵圓亞覈等覈糰高錶達CRF樣暘性產物, 而對照組相關覈糰內則極少或未齣現.結論: ①成功地穫得可用于免疫組化染色的CRF mAb和pAb.②提示CRF在中樞神經繫統對睡眠剝奪造成的應激反應的調節過程中具有重要的意義.下丘腦室徬覈、杏仁中央覈和終紋床覈是腦內相關調節環路的一部分.
목적:제비병감정촉신상선피질격소석방인자(CRF)적단극륭항체(mAb)화다극륭항체(pAb), 병연구기재수면박탈모형대서뇌내적변화.방법: 용CRF분별여우혈청백단백(BSA)화우갑상선구단백(BTG)교련, 제성면역원화검측용적포피항원.장BSA-CRF분별면역신서란대백토화자성BALB/c소서, 제비기mAb화pAb, 경 ELISA화면역세포화학염색등방법진행감정, 병용소획항체관찰CRF재정상성년대서수면박탈48 h후뇌내적변화.결과: 소획득적CRF pAb화9주mAb구유교고적효개、특이성급친화력.기중, pAb화2주mAb(1D10, 2F4)가용우면역조직화학염색.수면박탈48 h후하구뇌실방핵、행인핵중앙아핵、종문상핵란원아핵등핵단고표체CRF양양성산물, 이대조조상관핵단내칙겁소혹미출현.결론: ①성공지획득가용우면역조화염색적CRF mAb화pAb.②제시CRF재중추신경계통대수면박탈조성적응격반응적조절과정중구유중요적의의.하구뇌실방핵、행인중앙핵화종문상핵시뇌내상관조절배로적일부분.
