复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2006年
4期
544-546
,共3页
噬菌体展示%DNA错配修复蛋白MutS%可溶性抗体片段
噬菌體展示%DNA錯配脩複蛋白MutS%可溶性抗體片段
서균체전시%DNA착배수복단백MutS%가용성항체편단
目的制备MutS的高亲和抗体,以有利于MutS的检测及应用.方法利用IPTG的诱导作用,在E.coli中诱导表达目标蛋白MutS.利用亲和层析方法获得目标蛋白,并利用凝胶阻滞实验分析其活性.将MutS作为抗原,在Tomlinson抗体库中利用噬菌体展示技术来筛选MutS的高亲和力噬菌粒.将其转化到大肠杆菌后,诱导表达并通过亲和层析的方法来获得可溶性的抗体片段,并检测其亲和力.结果纯化后的MutS具有识别、结合错配DNA双链的活性.ELISA分析表明,利用噬菌体展示技术可获得MutS高亲和力的噬菌粒.将其转化到大肠杆菌HB2151后,诱导表达并纯化到抗体片段,其亲和力为0.9×108 L/mol.结论利用噬菌体展示技术筛选到MutS高亲和力的抗体.
目的製備MutS的高親和抗體,以有利于MutS的檢測及應用.方法利用IPTG的誘導作用,在E.coli中誘導錶達目標蛋白MutS.利用親和層析方法穫得目標蛋白,併利用凝膠阻滯實驗分析其活性.將MutS作為抗原,在Tomlinson抗體庫中利用噬菌體展示技術來篩選MutS的高親和力噬菌粒.將其轉化到大腸桿菌後,誘導錶達併通過親和層析的方法來穫得可溶性的抗體片段,併檢測其親和力.結果純化後的MutS具有識彆、結閤錯配DNA雙鏈的活性.ELISA分析錶明,利用噬菌體展示技術可穫得MutS高親和力的噬菌粒.將其轉化到大腸桿菌HB2151後,誘導錶達併純化到抗體片段,其親和力為0.9×108 L/mol.結論利用噬菌體展示技術篩選到MutS高親和力的抗體.
목적제비MutS적고친화항체,이유리우MutS적검측급응용.방법이용IPTG적유도작용,재E.coli중유도표체목표단백MutS.이용친화층석방법획득목표단백,병이용응효조체실험분석기활성.장MutS작위항원,재Tomlinson항체고중이용서균체전시기술래사선MutS적고친화력서균립.장기전화도대장간균후,유도표체병통과친화층석적방법래획득가용성적항체편단,병검측기친화력.결과순화후적MutS구유식별、결합착배DNA쌍련적활성.ELISA분석표명,이용서균체전시기술가획득MutS고친화력적서균립.장기전화도대장간균HB2151후,유도표체병순화도항체편단,기친화력위0.9×108 L/mol.결론이용서균체전시기술사선도MutS고친화력적항체.
