CAJ | 학술논문

背景:嗅鞘细胞和骨髓间充质干细胞均可修复脊髓损伤,两者联合能否发挥出更佳的修复效果还不太清楚.目的:观察嗅鞘细胞和骨髓间充质干细胞联合移植修复脊髓损伤的效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-10在临沂市人民医院和昆明医学院完成.材料:健康清洁级成年SD大鼠,雌性,体质量220～280 g,分为:正常对照组(n=5)、嗅鞘细胞移植组(n=10)、骨髓间充质干细胞移植组(n=10)、联合细胞移植组(n=10)、手术对照组(n=10).方法:分离大鼠嗅球组织和股骨,分离培养嗅鞘细胞和骨髓间充质干细胞.暴露大鼠脊髓予以尖刀离断制备完伞脊髓损伤动物模型,正常对照组仅打开椎板未行脊髓离断,嗅鞘细胞移植组、骨髓间充质干细胞移植组、联合移植组分别在断端及远近端注射嗅鞘细胞、骨髓间充质干细胞及嗅鞘细胞+骨髓间充质干细胞悬液,采取3点注射,3点的注射深度分别为0.5 mm、1.0 mm和1.5mm.手术埘照组在脊髓离断后仅注射培养基.主要观察指标:将嗅鞘细胞和骨髓间充质干细胞制成细胞悬液后接种培养,并应用P75抗体和BrdU抗体对联合培养的细胞进行免疫荧光鉴定.移植后评定大鼠脊髓功能恢复情况,并观察病理学改变和细胞存活情况.结果:联合培养的细胞部分相互编织成网,部分呈条索状,荧光鉴定双标阳性者为嗅鞘细胞,只发红色荧光而不发绿色荧光者为骨髓间充质干细胞.移植嗅鞘细胞和骨髓间充质干细胞的大鼠脊髓功能均有改善,移植4周后,联合移植组脊髓功能恢复优于细胞移植组.病理学观察显示,手术对照组脊髓结构破坏严重,损伤处可见大量空洞及神经元胞体萎缩,周围存在较多的空洞及组织液化,细胞数目较少,神经纤维排列紊乱;移植鞘细胞及骨髓间充质干细胞后脊髓结构仍破坏严重,但是空洞面积较少,有较多细胞存在,神经纤维排列较为整齐,荧光显微镜下见脊髓损伤处有较多的细胞核发出红色荧光,在脊髓损伤处的远近端也见有较多阳性细胞存在,联合移植组可见两种细胞同时存在,但细胞分布乱,无明显的捧列方向,未见明显的迁徙现象.结论:嗅鞘细胞与骨髓间充质干细胞在体外可以很好的联合培养,修复脊髓损伤,并且联合移植的恢复效果较单一细胞移植更为理想. 揹景:嗅鞘細胞和骨髓間充質榦細胞均可脩複脊髓損傷,兩者聯閤能否髮揮齣更佳的脩複效果還不太清楚.目的:觀察嗅鞘細胞和骨髓間充質榦細胞聯閤移植脩複脊髓損傷的效果.設計、時間及地點:隨機對照動物實驗,于2006-06/2007-10在臨沂市人民醫院和昆明醫學院完成.材料:健康清潔級成年SD大鼠,雌性,體質量220～280 g,分為:正常對照組(n=5)、嗅鞘細胞移植組(n=10)、骨髓間充質榦細胞移植組(n=10)、聯閤細胞移植組(n=10)、手術對照組(n=10).方法:分離大鼠嗅毬組織和股骨,分離培養嗅鞘細胞和骨髓間充質榦細胞.暴露大鼠脊髓予以尖刀離斷製備完傘脊髓損傷動物模型,正常對照組僅打開椎闆未行脊髓離斷,嗅鞘細胞移植組、骨髓間充質榦細胞移植組、聯閤移植組分彆在斷耑及遠近耑註射嗅鞘細胞、骨髓間充質榦細胞及嗅鞘細胞+骨髓間充質榦細胞懸液,採取3點註射,3點的註射深度分彆為0.5 mm、1.0 mm和1.5mm.手術塒照組在脊髓離斷後僅註射培養基.主要觀察指標:將嗅鞘細胞和骨髓間充質榦細胞製成細胞懸液後接種培養,併應用P75抗體和BrdU抗體對聯閤培養的細胞進行免疫熒光鑒定.移植後評定大鼠脊髓功能恢複情況,併觀察病理學改變和細胞存活情況.結果:聯閤培養的細胞部分相互編織成網,部分呈條索狀,熒光鑒定雙標暘性者為嗅鞘細胞,隻髮紅色熒光而不髮綠色熒光者為骨髓間充質榦細胞.移植嗅鞘細胞和骨髓間充質榦細胞的大鼠脊髓功能均有改善,移植4週後,聯閤移植組脊髓功能恢複優于細胞移植組.病理學觀察顯示,手術對照組脊髓結構破壞嚴重,損傷處可見大量空洞及神經元胞體萎縮,週圍存在較多的空洞及組織液化,細胞數目較少,神經纖維排列紊亂;移植鞘細胞及骨髓間充質榦細胞後脊髓結構仍破壞嚴重,但是空洞麵積較少,有較多細胞存在,神經纖維排列較為整齊,熒光顯微鏡下見脊髓損傷處有較多的細胞覈髮齣紅色熒光,在脊髓損傷處的遠近耑也見有較多暘性細胞存在,聯閤移植組可見兩種細胞同時存在,但細胞分佈亂,無明顯的捧列方嚮,未見明顯的遷徙現象.結論:嗅鞘細胞與骨髓間充質榦細胞在體外可以很好的聯閤培養,脩複脊髓損傷,併且聯閤移植的恢複效果較單一細胞移植更為理想.
배경:후초세포화골수간충질간세포균가수복척수손상,량자연합능부발휘출경가적수복효과환불태청초.목적:관찰후초세포화골수간충질간세포연합이식수복척수손상적효과.설계、시간급지점:수궤대조동물실험,우2006-06/2007-10재림기시인민의원화곤명의학원완성.재료:건강청길급성년SD대서,자성,체질량220～280 g,분위:정상대조조(n=5)、후초세포이식조(n=10)、골수간충질간세포이식조(n=10)、연합세포이식조(n=10)、수술대조조(n=10).방법:분리대서후구조직화고골,분리배양후초세포화골수간충질간세포.폭로대서척수여이첨도리단제비완산척수손상동물모형,정상대조조부타개추판미행척수리단,후초세포이식조、골수간충질간세포이식조、연합이식조분별재단단급원근단주사후초세포、골수간충질간세포급후초세포+골수간충질간세포현액,채취3점주사,3점적주사심도분별위0.5 mm、1.0 mm화1.5mm.수술시조조재척수리단후부주사배양기.주요관찰지표:장후초세포화골수간충질간세포제성세포현액후접충배양,병응용P75항체화BrdU항체대연합배양적세포진행면역형광감정.이식후평정대서척수공능회복정황,병관찰병이학개변화세포존활정황.결과:연합배양적세포부분상호편직성망,부분정조색상,형광감정쌍표양성자위후초세포,지발홍색형광이불발록색형광자위골수간충질간세포.이식후초세포화골수간충질간세포적대서척수공능균유개선,이식4주후,연합이식조척수공능회복우우세포이식조.병이학관찰현시,수술대조조척수결구파배엄중,손상처가견대량공동급신경원포체위축,주위존재교다적공동급조직액화,세포수목교소,신경섬유배렬문란;이식초세포급골수간충질간세포후척수결구잉파배엄중,단시공동면적교소,유교다세포존재,신경섬유배렬교위정제,형광현미경하견척수손상처유교다적세포핵발출홍색형광,재척수손상처적원근단야견유교다양성세포존재,연합이식조가견량충세포동시존재,단세포분포란,무명현적봉렬방향,미견명현적천사현상.결론:후초세포여골수간충질간세포재체외가이흔호적연합배양,수복척수손상,병차연합이식적회복효과교단일세포이식경위이상.