腺病毒载体介导的ING4基因对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用
선병독재체개도적ING4기인대MG-63인골육류세포적억제작용
The growth-inhibitory effect of recombinant ING4-Adenovirus on MG-63 osteosarcoma cells
  • 万方数据
    中国免疫学杂志 중국면역학잡지
    CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
    2009年 3期 234-239 ,共6页

    井莹莹%杨吉成%缪竞诚%盛伟华%胡志清%单云波%刘铁连%韩亚丽%包婉蓉

    정형형%양길성%무경성%성위화%호지청%단운파%류철련%한아려%포완용

    ING4基因%腺病毒载体%MG-63人骨肉瘤细胞%凋亡 ING4基因%腺病毒載體%MG-63人骨肉瘤細胞%凋亡
    ING4기인%선병독재체%MG-63인골육류세포%조망
    目的:用人源化改造的鼠肿瘤生长抑制因子(mING4)基因构建的腺病毒表达载体(Ad-ING4)研究对MG-63人骨肉瘤细胞的抑制作用.方法:以pcDNA3.0-mING-4重组质粒为模板,通过基因定点突变技术对mING4基因进行人源化改造,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人ING-4氨基酸序列相同的重组腺病毒子(Ad-ING4),感染MG-63细胞,用荧光显微镜、RT-PCR法检测ING4在MG-63细胞中的转录和表达;MTT法和流式细胞技术检测ING4基因表达对MG-63细胞的生长抑制和凋亡效应;荧光共聚焦显微镜观察MG-63细胞凋亡的形态学变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因表达对MG-63细胞巾的Bax、Bcl-2基闪表达的影响.结果:基因测序和PCR分析结果显示,人源化改造的小鼠ING4分子氨基酸序列与人ING4分子完全相同,成功构建了Ad-ING4腺病毒表达载体,在MG-63细胞中ING4基因的表达对MG-63细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,出现典型细胞凋亡形态学变化,ING4基因表达可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡.结论:转染ING4基因可明显抑制MG-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导细胞凋亡,该现象可能是通过改变Bax,Bcl-2表达水平来发挥抗肿瘤作用的.
    목적:용인원화개조적서종류생장억제인자(mING4)기인구건적선병독표체재체(Ad-ING4)연구대MG-63인골육류세포적억제작용.방법:이pcDNA3.0-mING-4중조질립위모판,통과기인정점돌변기술대mING4기인진행인원화개조,채용선병독재체적기인중조화체외포장기술획득표체여인ING-4안기산서렬상동적중조선병독자(Ad-ING4),감염MG-63세포,용형광현미경、RT-PCR법검측ING4재MG-63세포중적전록화표체;MTT법화류식세포기술검측ING4기인표체대MG-63세포적생장억제화조망효응;형광공취초현미경관찰MG-63세포조망적형태학변화;반정량RT-PCR법검측ING4기인표체대MG-63세포건적Bax、Bcl-2기섬표체적영향.결과:기인측서화PCR분석결과현시,인원화개조적소서ING4분자안기산서렬여인ING4분자완전상동,성공구건료Ad-ING4선병독표체재체,재MG-63세포중ING4기인적표체대MG-63세포증식유명현억제작용,병가유도세포조망,출현전형세포조망형태학변화,ING4기인표체가통과상조세포중Bax화하조Bcl-2기인표체유도세포조망.결론:전염ING4기인가명현억제MG-63인골육류세포적생장,유도세포조망,해현상가능시통과개변Bax,Bcl-2표체수평래발휘항종류작용적.
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