浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2010年
2期
167-172
,共6页
杨飞%李志邈%杨悦俭%叶青静%王荣青%阮美颖
楊飛%李誌邈%楊悅儉%葉青靜%王榮青%阮美穎
양비%리지막%양열검%협청정%왕영청%원미영
番茄%植物甜蛋白%ThaumatinⅡ基因%遗传转化
番茄%植物甜蛋白%ThaumatinⅡ基因%遺傳轉化
번가%식물첨단백%ThaumatinⅡ기인%유전전화
以番茄无菌苗的子叶为外植体,以抗卡那霉素的NPTⅡ作为选择标记基因,通过根癌农杆菌介导法,将甜蛋白ThaumatinⅡ基因导入番茄中,共获得10株独立的抗性转化株系.对抗性转化株系进行了PCR和Southern blotting鉴定,PCR检测得到了预期的特异条带,Southern blotting结果表明其中1个转化株系插入了2个拷贝的ThaumatinⅡcDNA.以上试验结果证明ThaumatinⅡ基因已经整合到转基因番茄植株的基因组中,为最终获得在蛋白质水平表达ThaumatinⅡ的无选择标记的转基因番茄打下了基础.
以番茄無菌苗的子葉為外植體,以抗卡那黴素的NPTⅡ作為選擇標記基因,通過根癌農桿菌介導法,將甜蛋白ThaumatinⅡ基因導入番茄中,共穫得10株獨立的抗性轉化株繫.對抗性轉化株繫進行瞭PCR和Southern blotting鑒定,PCR檢測得到瞭預期的特異條帶,Southern blotting結果錶明其中1箇轉化株繫插入瞭2箇拷貝的ThaumatinⅡcDNA.以上試驗結果證明ThaumatinⅡ基因已經整閤到轉基因番茄植株的基因組中,為最終穫得在蛋白質水平錶達ThaumatinⅡ的無選擇標記的轉基因番茄打下瞭基礎.
이번가무균묘적자협위외식체,이항잡나매소적NPTⅡ작위선택표기기인,통과근암농간균개도법,장첨단백ThaumatinⅡ기인도입번가중,공획득10주독립적항성전화주계.대항성전화주계진행료PCR화Southern blotting감정,PCR검측득도료예기적특이조대,Southern blotting결과표명기중1개전화주계삽입료2개고패적ThaumatinⅡcDNA.이상시험결과증명ThaumatinⅡ기인이경정합도전기인번가식주적기인조중,위최종획득재단백질수평표체ThaumatinⅡ적무선택표기적전기인번가타하료기출.
