中国生化药物杂志
中國生化藥物雜誌
중국생화약물잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMICAL PHARMACEUTICS
2010年
3期
145-149,157
,共6页
陶凤云%赵伟%林强%马润宇
陶鳳雲%趙偉%林彊%馬潤宇
도봉운%조위%림강%마윤우
中华眼镜蛇%核糖核酸酶%分离纯化%抑菌作用%细胞毒性%抗氧化
中華眼鏡蛇%覈糖覈痠酶%分離純化%抑菌作用%細胞毒性%抗氧化
중화안경사%핵당핵산매%분리순화%억균작용%세포독성%항양화
目的 从中华眼镜蛇毒中分离纯化核糖核酸酶,并研究其生物学活性.方法 以中华眼镜蛇毒为原料,采用SP-Trisacryl阳离子交换色谱、Sephadex G-75凝胶色谱、C8反相色谱等纯化方法,分离纯化具有核糖核酸酶活性的蛋白质,表征其酶学性质,检测其抑菌性、抗肿瘤细胞作用及抗氧化作用.结果 SDS-PAGE电泳显示纯化的中华眼镜蛇毒核糖核酸酶(Na-Rnase)为相对分子质量为13 000的单一成分.该酶最适反应温度为40 ℃,最适pH值为6.5,米氏常数为3.67 μmol/L,最大反应速率为3.52 pmol/s.在体外抑菌实验中,在8 μmol/L的浓度下对大肠艾希菌和金黄葡萄球菌均未显示出显著抑制作用;在体外细胞毒性实验中,对于Hela肿瘤细胞和正常的人成纤维细胞在8 μmol/L的浓度下无明显抑制作用;在抗氧化实验中,浓度达到71.5 μmol/mL时,对小鼠肝微粒体脂质过氧化反应的抑制率为41.30%.结论 中华眼镜蛇毒中的核糖核酸酶具有抗氧化作用,可能作为氧化还原的调节剂,在有关的疾病治疗方面具有应用的潜能.
目的 從中華眼鏡蛇毒中分離純化覈糖覈痠酶,併研究其生物學活性.方法 以中華眼鏡蛇毒為原料,採用SP-Trisacryl暘離子交換色譜、Sephadex G-75凝膠色譜、C8反相色譜等純化方法,分離純化具有覈糖覈痠酶活性的蛋白質,錶徵其酶學性質,檢測其抑菌性、抗腫瘤細胞作用及抗氧化作用.結果 SDS-PAGE電泳顯示純化的中華眼鏡蛇毒覈糖覈痠酶(Na-Rnase)為相對分子質量為13 000的單一成分.該酶最適反應溫度為40 ℃,最適pH值為6.5,米氏常數為3.67 μmol/L,最大反應速率為3.52 pmol/s.在體外抑菌實驗中,在8 μmol/L的濃度下對大腸艾希菌和金黃葡萄毬菌均未顯示齣顯著抑製作用;在體外細胞毒性實驗中,對于Hela腫瘤細胞和正常的人成纖維細胞在8 μmol/L的濃度下無明顯抑製作用;在抗氧化實驗中,濃度達到71.5 μmol/mL時,對小鼠肝微粒體脂質過氧化反應的抑製率為41.30%.結論 中華眼鏡蛇毒中的覈糖覈痠酶具有抗氧化作用,可能作為氧化還原的調節劑,在有關的疾病治療方麵具有應用的潛能.
목적 종중화안경사독중분리순화핵당핵산매,병연구기생물학활성.방법 이중화안경사독위원료,채용SP-Trisacryl양리자교환색보、Sephadex G-75응효색보、C8반상색보등순화방법,분리순화구유핵당핵산매활성적단백질,표정기매학성질,검측기억균성、항종류세포작용급항양화작용.결과 SDS-PAGE전영현시순화적중화안경사독핵당핵산매(Na-Rnase)위상대분자질량위13 000적단일성분.해매최괄반응온도위40 ℃,최괄pH치위6.5,미씨상수위3.67 μmol/L,최대반응속솔위3.52 pmol/s.재체외억균실험중,재8 μmol/L적농도하대대장애희균화금황포도구균균미현시출현저억제작용;재체외세포독성실험중,대우Hela종류세포화정상적인성섬유세포재8 μmol/L적농도하무명현억제작용;재항양화실험중,농도체도71.5 μmol/mL시,대소서간미립체지질과양화반응적억제솔위41.30%.결론 중화안경사독중적핵당핵산매구유항양화작용,가능작위양화환원적조절제,재유관적질병치료방면구유응용적잠능.
