CAJ | 학술논문

一般认为急性髓细胞白血病(AML)是对甲氨蝶呤(MTX)原发耐药的恶性肿瘤.AML细胞除急性单核细胞白血病(AML-M5)细胞与MTX孵育时,由于不能象急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞一样形成足够量的长链聚谷氨酸盐甲氨蝶呤(MTXPG),而被认为对MTX不敏感.为了开发对AML-M5新的治疗,本实验采用了具有单核细胞特征的U937细胞系进行研究.细胞分别通过不同浓度(1 nmol/L-100μmol/L)MTX孵育24小时或48小时后,通过XTT法评估细胞生长抑制情况.24小时的半数抑制浓度(IC50)为0.04μmol/L;48小时的IC50为0.037μmol/L,90%细胞抑制浓度(IC90)为0.39μml/L.为了解MTX细胞毒作用的发生机制,进一步分析了细胞的死亡过程.采用了系列实验,包括台盼蓝拒染法、流式细胞术、显微镜(瑞氏染色法)及DNA片段分析进行研究.结果在MTX作用后短时间内(4或6小时)无明显的细胞凋亡特征出现.随5 nmol/L-10μmol/L MTX作用8小时后,亚G1(凋亡)峰的比率从0.1μmol/L的3.2%增加到5.0μmol/L的18.2%,S期的比率从0.01 μmol/L的41.2%到10 μmol/L的19.1%.可见到DNA片段电泳后细胞凋亡的特征性改变.MTX所引发U937细胞的生长阻滞和凋亡特征,提示它可用于AMLM5治疗的潜在可能.
일반인위급성수세포백혈병(AML)시대갑안접령(MTX)원발내약적악성종류.AML세포제급성단핵세포백혈병(AML-M5)세포여MTX부육시,유우불능상급성림파세포백혈병(ALL)세포일양형성족구량적장련취곡안산염갑안접령(MTXPG),이피인위대MTX불민감.위료개발대AML-M5신적치료,본실험채용료구유단핵세포특정적U937세포계진행연구.세포분별통과불동농도(1 nmol/L-100μmol/L)MTX부육24소시혹48소시후,통과XTT법평고세포생장억제정황.24소시적반수억제농도(IC50)위0.04μmol/L;48소시적IC50위0.037μmol/L,90%세포억제농도(IC90)위0.39μml/L.위료해MTX세포독작용적발생궤제,진일보분석료세포적사망과정.채용료계렬실험,포괄태반람거염법、류식세포술、현미경(서씨염색법)급DNA편단분석진행연구.결과재MTX작용후단시간내(4혹6소시)무명현적세포조망특정출현.수5 nmol/L-10μmol/L MTX작용8소시후,아G1(조망)봉적비솔종0.1μmol/L적3.2%증가도5.0μmol/L적18.2%,S기적비솔종0.01 μmol/L적41.2%도10 μmol/L적19.1%.가견도DNA편단전영후세포조망적특정성개변.MTX소인발U937세포적생장조체화조망특정,제시타가용우AMLM5치료적잠재가능.