中国科学(C辑)
中國科學(C輯)
중국과학(C집)
SCIENCE IN CHINA(SERIES C)
2000年
4期
363-369
,共7页
孙钦秒%李良璧%毛大璋%匡廷云
孫欽秒%李良璧%毛大璋%劻廷雲
손흠초%리량벽%모대장%광정운
Lhcb2%高效表达%色素%重组%光谱分析
Lhcb2%高效錶達%色素%重組%光譜分析
Lhcb2%고효표체%색소%중조%광보분석
将豌豆的Lhcb2基因亚克隆至原核表达载体pET-3d上, 通过定点突变使其在大肠杆菌BL21 (DE3)中得到高效表达, 其表达量约占大肠杆菌总蛋白的40%, 经纯化后获得电泳纯的Lhcb2蛋白. 采用改进的液氮/室温冻融的重组方法将纯化的蛋白与色素进行重组, 建立了高效的重组系统. 重组后所获得的LHCB2单体与天然的LHCⅡ单体相比, 其在部分变性胶的电泳行为、低温荧光发射光谱和激发光谱, 以及室温吸收光谱等方面都非常相似, 说明大量表达的Lhcb2蛋白与色素已成功地重组, 并具有与天然LHCⅡ单体相类似的组成和结构.
將豌豆的Lhcb2基因亞剋隆至原覈錶達載體pET-3d上, 通過定點突變使其在大腸桿菌BL21 (DE3)中得到高效錶達, 其錶達量約佔大腸桿菌總蛋白的40%, 經純化後穫得電泳純的Lhcb2蛋白. 採用改進的液氮/室溫凍融的重組方法將純化的蛋白與色素進行重組, 建立瞭高效的重組繫統. 重組後所穫得的LHCB2單體與天然的LHCⅡ單體相比, 其在部分變性膠的電泳行為、低溫熒光髮射光譜和激髮光譜, 以及室溫吸收光譜等方麵都非常相似, 說明大量錶達的Lhcb2蛋白與色素已成功地重組, 併具有與天然LHCⅡ單體相類似的組成和結構.
장완두적Lhcb2기인아극륭지원핵표체재체pET-3d상, 통과정점돌변사기재대장간균BL21 (DE3)중득도고효표체, 기표체량약점대장간균총단백적40%, 경순화후획득전영순적Lhcb2단백. 채용개진적액담/실온동융적중조방법장순화적단백여색소진행중조, 건립료고효적중조계통. 중조후소획득적LHCB2단체여천연적LHCⅡ단체상비, 기재부분변성효적전영행위、저온형광발사광보화격발광보, 이급실온흡수광보등방면도비상상사, 설명대량표체적Lhcb2단백여색소이성공지중조, 병구유여천연LHCⅡ단체상유사적조성화결구.
