第二军医大学学报
第二軍醫大學學報
제이군의대학학보
ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2004年
12期
1335-1337
,共3页
周演武%谢菲%周琳%娄加陶%侯彦强%耿红莲%仲人前
週縯武%謝菲%週琳%婁加陶%侯彥彊%耿紅蓮%仲人前
주연무%사비%주림%루가도%후언강%경홍련%중인전
人外周血单个核细胞%BLyS127-285%基因表达
人外週血單箇覈細胞%BLyS127-285%基因錶達
인외주혈단개핵세포%BLyS127-285%기인표체
目的:从人外周血单个核细胞中克隆出B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)胞外区片段BLyS127-285,并进行表达和纯化.方法:采用RT-PCR技术,从人外周血单个核细胞中扩增BLyS127-285,测序后构建原核表达载体,经IPTG诱导表达及Ni-NTA纯化,以SDS-PAGE和Western印迹法进行鉴定.结果:RT-PCR扩增出一个480 bp的DNA片段,序列分析与GenBank中报道的人BLyS127-285的cDNA序列一致,该胞外区片段在大肠杆菌中得到高效表达,表达量可达菌体总蛋白的49.8%,纯化后纯度可达97.0%.结论:成功地从人外周血单个核细胞中扩增出人BLyS127-285,并获得高效表达,其纯化产物为进一步研究其功能、开发与临床应用奠定了基础.
目的:從人外週血單箇覈細胞中剋隆齣B淋巴細胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)胞外區片段BLyS127-285,併進行錶達和純化.方法:採用RT-PCR技術,從人外週血單箇覈細胞中擴增BLyS127-285,測序後構建原覈錶達載體,經IPTG誘導錶達及Ni-NTA純化,以SDS-PAGE和Western印跡法進行鑒定.結果:RT-PCR擴增齣一箇480 bp的DNA片段,序列分析與GenBank中報道的人BLyS127-285的cDNA序列一緻,該胞外區片段在大腸桿菌中得到高效錶達,錶達量可達菌體總蛋白的49.8%,純化後純度可達97.0%.結論:成功地從人外週血單箇覈細胞中擴增齣人BLyS127-285,併穫得高效錶達,其純化產物為進一步研究其功能、開髮與臨床應用奠定瞭基礎.
목적:종인외주혈단개핵세포중극륭출B림파세포자격인자(B lymphocyte stimulator,BLyS)포외구편단BLyS127-285,병진행표체화순화.방법:채용RT-PCR기술,종인외주혈단개핵세포중확증BLyS127-285,측서후구건원핵표체재체,경IPTG유도표체급Ni-NTA순화,이SDS-PAGE화Western인적법진행감정.결과:RT-PCR확증출일개480 bp적DNA편단,서렬분석여GenBank중보도적인BLyS127-285적cDNA서렬일치,해포외구편단재대장간균중득도고효표체,표체량가체균체총단백적49.8%,순화후순도가체97.0%.결론:성공지종인외주혈단개핵세포중확증출인BLyS127-285,병획득고효표체,기순화산물위진일보연구기공능、개발여림상응용전정료기출.
