生物学杂志
生物學雜誌
생물학잡지
JOURNAL OF BIOLOGY
2005年
3期
8-10
,共3页
曹荣月%申克宇%王学军%凤姣%刘景晶
曹榮月%申剋宇%王學軍%鳳姣%劉景晶
조영월%신극우%왕학군%봉교%류경정
发酵%重组L-门冬酰胺酶%聚乙二醇%化学修饰
髮酵%重組L-門鼕酰胺酶%聚乙二醇%化學脩飾
발효%중조L-문동선알매%취을이순%화학수식
目的提高重组L-门冬酰胺酶(Rl-ASP)工程菌的表达量,分离纯化rL-ASP并对之进行PEG化学修饰.方法 将带有编码rL-AS的基因的质粒(pKA)导入不同的宿主菌中,挑出高表达菌株,同时优化发酵培养基,分离纯化获得的高纯度rL-ASP再用PEG进行化学修饰,SDS-PAGE检测修饰效果.结果在pH7.0的条件下,宿主菌为JM109的工程菌pKA/JM109酶活力最高,三角瓶振摇培养的酶活力可达216×103IU/L;发酵罐发酵培养,酶活力达312×103IU/L.纯化后的rL-ASP比活力为220 IU/mg,rL-ASP经过PEG化学修饰生成rL-ASP-PEG,分子量发生改变.结论改变目标蛋白表达的宿主菌和优化发酵工艺,提高了rL-ASP的表达量,纯化的rL-ASP经过PEG化学修饰后分子量增大.
目的提高重組L-門鼕酰胺酶(Rl-ASP)工程菌的錶達量,分離純化rL-ASP併對之進行PEG化學脩飾.方法 將帶有編碼rL-AS的基因的質粒(pKA)導入不同的宿主菌中,挑齣高錶達菌株,同時優化髮酵培養基,分離純化穫得的高純度rL-ASP再用PEG進行化學脩飾,SDS-PAGE檢測脩飾效果.結果在pH7.0的條件下,宿主菌為JM109的工程菌pKA/JM109酶活力最高,三角瓶振搖培養的酶活力可達216×103IU/L;髮酵罐髮酵培養,酶活力達312×103IU/L.純化後的rL-ASP比活力為220 IU/mg,rL-ASP經過PEG化學脩飾生成rL-ASP-PEG,分子量髮生改變.結論改變目標蛋白錶達的宿主菌和優化髮酵工藝,提高瞭rL-ASP的錶達量,純化的rL-ASP經過PEG化學脩飾後分子量增大.
목적제고중조L-문동선알매(Rl-ASP)공정균적표체량,분리순화rL-ASP병대지진행PEG화학수식.방법 장대유편마rL-AS적기인적질립(pKA)도입불동적숙주균중,도출고표체균주,동시우화발효배양기,분리순화획득적고순도rL-ASP재용PEG진행화학수식,SDS-PAGE검측수식효과.결과재pH7.0적조건하,숙주균위JM109적공정균pKA/JM109매활력최고,삼각병진요배양적매활력가체216×103IU/L;발효관발효배양,매활력체312×103IU/L.순화후적rL-ASP비활력위220 IU/mg,rL-ASP경과PEG화학수식생성rL-ASP-PEG,분자량발생개변.결론개변목표단백표체적숙주균화우화발효공예,제고료rL-ASP적표체량,순화적rL-ASP경과PEG화학수식후분자량증대.
