复旦学报（自然科学版）
複旦學報（自然科學版）
복단학보（자연과학판）
JOURNAL OF FUDAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2005年
4期
560-565
,共6页
胡翔华%刘南松%吕红%袁汉英%李育阳
鬍翔華%劉南鬆%呂紅%袁漢英%李育暘
호상화%류남송%려홍%원한영%리육양
乙肝重组抗原SpreS1%毕赤氏酵母菌%镍离子柱%融合抗原
乙肝重組抗原SpreS1%畢赤氏酵母菌%鎳離子柱%融閤抗原
을간중조항원SpreS1%필적씨효모균%얼리자주%융합항원
乙肝病毒融合抗原SpreS1(简称SS1抗原)较S抗原有更强的免疫原性,可望有更好的临床应用前景.为了便于表达产物的纯化,利用化学合成的寡聚核苷酸链和PCR扩增,在SS1基因的5'端和3'端分别融合了6His-EK和6His的编码序列,将其重组质粒pPIC3.5k-6His-EK-SS1,pPIC3.5k-SS1-6His转化毕赤氏酵母菌GS115,筛选鉴定得到的重组酵母工程菌进行诱导培养,然后采用镍离子柱(Ni-NTA Basin)纯化表达产物,纯化的蛋白样品经ELISA效价测定、SDS-PAGE和Western Blot分析,结果表明融合抗原基因6His-EK-SS1和SS1-6His在毕赤氏酵母中均能表达,纯化的产物仍有免疫原性,所用的纯化方法简便有效.
乙肝病毒融閤抗原SpreS1(簡稱SS1抗原)較S抗原有更彊的免疫原性,可望有更好的臨床應用前景.為瞭便于錶達產物的純化,利用化學閤成的寡聚覈苷痠鏈和PCR擴增,在SS1基因的5'耑和3'耑分彆融閤瞭6His-EK和6His的編碼序列,將其重組質粒pPIC3.5k-6His-EK-SS1,pPIC3.5k-SS1-6His轉化畢赤氏酵母菌GS115,篩選鑒定得到的重組酵母工程菌進行誘導培養,然後採用鎳離子柱(Ni-NTA Basin)純化錶達產物,純化的蛋白樣品經ELISA效價測定、SDS-PAGE和Western Blot分析,結果錶明融閤抗原基因6His-EK-SS1和SS1-6His在畢赤氏酵母中均能錶達,純化的產物仍有免疫原性,所用的純化方法簡便有效.
을간병독융합항원SpreS1(간칭SS1항원)교S항원유경강적면역원성,가망유경호적림상응용전경.위료편우표체산물적순화,이용화학합성적과취핵감산련화PCR확증,재SS1기인적5'단화3'단분별융합료6His-EK화6His적편마서렬,장기중조질립pPIC3.5k-6His-EK-SS1,pPIC3.5k-SS1-6His전화필적씨효모균GS115,사선감정득도적중조효모공정균진행유도배양,연후채용얼리자주(Ni-NTA Basin)순화표체산물,순화적단백양품경ELISA효개측정、SDS-PAGE화Western Blot분석,결과표명융합항원기인6His-EK-SS1화SS1-6His재필적씨효모중균능표체,순화적산물잉유면역원성,소용적순화방법간편유효.
