CAJ | 학술논문

提高解冻胚胎的发育能力和简化冷冻-解冻程序是胚胎冷冻研究的两大永恒的主题.尽管乙二醇(EG)广泛用于家畜胚胎冷冻,但很少用于冷冻小鼠和人胚胎.为数很少的以EG慢冻小鼠或人胚胎的研究均采用较为复杂的人胚冷冻程序,未见简化程序和用EG冷冻小鼠桑椹胚的报道.采用简单的牛胚胎冷冻程序研究了发育时期、EG浓度、平衡方法、添加蔗糖以及解冻后脱除EG等对小鼠胚胎冻后发育能力的影响.结果显示:(1)致密晚期桑椹胚冻后体外培养囊胚发育率(81.92%±2.24%)和孵出率(68.56%±2.43%)显著(P＜0.05)高于4-细胞、8-细胞胚胎和致密早期桑椹胚胎;(2)1.8mol/L EG冷冻小鼠致密晚期桑椹胚的囊胚发育和孵出率显著高于其它浓度;(3)在EG中平衡10min的冻后囊胚发育显著好于平衡5、20或30min;(4)两步平衡冷冻胚胎的囊胚发育率和孵出率显著高于一步平衡;(5)用EG冷冻小鼠胚胎无需添加蔗糖;(6)解冻后可不脱除EG;(7)冻后发育的早期囊胚和囊胚细胞数明显少于体内发育胚胎.因此,用EG冷冻小鼠胚胎的最佳方案为:致密晚期桑椹胚用1.8mol/L EG不添加蔗糖、两步平衡15min、以简单的牛胚胎冷冻程序冷冻-解冻、解冻后不脱除EG直接培养或移植.
제고해동배태적발육능력화간화냉동-해동정서시배태냉동연구적량대영항적주제.진관을이순(EG)엄범용우가축배태냉동,단흔소용우냉동소서화인배태.위수흔소적이EG만동소서혹인배태적연구균채용교위복잡적인배냉동정서,미견간화정서화용EG냉동소서상심배적보도.채용간단적우배태냉동정서연구료발육시기、EG농도、평형방법、첨가자당이급해동후탈제EG등대소서배태동후발육능력적영향.결과현시:(1)치밀만기상심배동후체외배양낭배발육솔(81.92%±2.24%)화부출솔(68.56%±2.43%)현저(P＜0.05)고우4-세포、8-세포배태화치밀조기상심배태;(2)1.8mol/L EG냉동소서치밀만기상심배적낭배발육화부출솔현저고우기타농도;(3)재EG중평형10min적동후낭배발육현저호우평형5、20혹30min;(4)량보평형냉동배태적낭배발육솔화부출솔현저고우일보평형;(5)용EG냉동소서배태무수첨가자당;(6)해동후가불탈제EG;(7)동후발육적조기낭배화낭배세포수명현소우체내발육배태.인차,용EG냉동소서배태적최가방안위:치밀만기상심배용1.8mol/L EG불첨가자당、량보평형15min、이간단적우배태냉동정서냉동-해동、해동후불탈제EG직접배양혹이식.