CAJ | 학술논문

目的:研究siRNA(small interfering RNA)对人胃腺癌细胞SGC-7901的VEGF基因表达的影响.方法:选择血管内皮生长因子(VEGF)基因为靶基因,设计两组针对VEGF mRNA的小干扰RNA,合成DNA寡核苷酸链,体外转录合成siRNA.以人胃腺癌细胞系SGC-7901为靶细胞,应用脂质体转染的方法,将siRNA导入细胞.采用Hoechst33258染色观察siRNA作用于SGC-7901细胞中出现凋亡小体的情况,流式细胞仪检测细胞周期的改变,RT-PCR法比较转染前后VEGF mRNA表达水平的变化,ELISA法检测细胞培养液中VEGF蛋白分泌量的变化.结果:两组siRNA转染后均能有效地抑制SGC-7901细胞的生长,诱导细胞凋亡产生凋亡小体.siRNA作用于SGC-7901细胞,其细胞周期均发生了明显的变化,主要表现为G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,并使细胞周期阻滞于G0/G1期(siRNA1组,siRNA2组G0/G1期vs对照组G0/G1期:75.04%,76.52%vs 58.37%,P＜0.01;siRNA1组,siRNA2组S期vs对照组S期:17.82%,16.73%vs39.52%,P＜0.01),而其他组则无明显变化.VEGF mRNA的表达量大幅度减少(siRNA1组,siRNA2组vs对照组:0.638±0.078,0.656±0.085 vs 0.941±0.046,P＜0.01),相对应的VEGF蛋白水平也显著降低(164.7±22.7,166.3±26.6 vs 414.0±61.5,P＜0.01),而其他组siRNA转染后则无上述作用.结论:应用靶向VEGF基因RNA干扰技术可以有效抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖.
목적:연구siRNA(small interfering RNA)대인위선암세포SGC-7901적VEGF기인표체적영향.방법:선택혈관내피생장인자(VEGF)기인위파기인,설계량조침대VEGF mRNA적소간우RNA,합성DNA과핵감산련,체외전록합성siRNA.이인위선암세포계SGC-7901위파세포,응용지질체전염적방법,장siRNA도입세포.채용Hoechst33258염색관찰siRNA작용우SGC-7901세포중출현조망소체적정황,류식세포의검측세포주기적개변,RT-PCR법비교전염전후VEGF mRNA표체수평적변화,ELISA법검측세포배양액중VEGF단백분비량적변화.결과:량조siRNA전염후균능유효지억제SGC-7901세포적생장,유도세포조망산생조망소체.siRNA작용우SGC-7901세포,기세포주기균발생료명현적변화,주요표현위G0/G1기세포증다,S기세포감소,병사세포주기조체우G0/G1기(siRNA1조,siRNA2조G0/G1기vs대조조G0/G1기:75.04%,76.52%vs 58.37%,P＜0.01;siRNA1조,siRNA2조S기vs대조조S기:17.82%,16.73%vs39.52%,P＜0.01),이기타조칙무명현변화.VEGF mRNA적표체량대폭도감소(siRNA1조,siRNA2조vs대조조:0.638±0.078,0.656±0.085 vs 0.941±0.046,P＜0.01),상대응적VEGF단백수평야현저강저(164.7±22.7,166.3±26.6 vs 414.0±61.5,P＜0.01),이기타조siRNA전염후칙무상술작용.결론:응용파향VEGF기인RNA간우기술가이유효억제위암세포SGC-7901적증식.