免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2007年
6期
610-613,618
,共5页
秦娜琳%尹丙姣%王妮丹%朱建华%庞艳%姜小丹%冯玮%李卓娅
秦娜琳%尹丙姣%王妮丹%硃建華%龐豔%薑小丹%馮瑋%李卓婭
진나림%윤병교%왕니단%주건화%방염%강소단%풍위%리탁아
跨膜型肿瘤坏死因子-α胞内段基序%NF-κB%反向信号%MCF-7细胞
跨膜型腫瘤壞死因子-α胞內段基序%NF-κB%反嚮信號%MCF-7細胞
과막형종류배사인자-α포내단기서%NF-κB%반향신호%MCF-7세포
目的 建立高表达跨膜型肿瘤坏死因子-α胞内段(TNF-intracellular domain,TNF-ICD)基序的人乳腺癌MCF-7细胞株,为研究TM-TNF-α的反向信号提供工具.方法 采用脂质体介入法将含人TNF-ICD的pIRES2-EGFP病毒载体导入MCF-7中,经鉴定、筛选获得能稳定表达TNF-ICD细胞株.采用MTT法检测转染细胞对TNF-α的敏感度,比色法检测NO含量,ELISA方法 检测NF-κB的活性.结果 TNF-ICD基因转染入MCF-7细胞后表达在细胞膜上,并能提高该细胞NF-κB活性,抵抗TNF-α的杀伤,增加其NO产生;应用NF-κB抑制剂PDTC处理后能恢复该细胞对TNF的敏感性.结论 获得稳定表达TNF-ICD的MCF-7细胞株,TNF-ICD可能作为TM-TNF-α细胞内的一段活化基序参与TM-TNF-α的反向信号,并通过活化NF-κB,抵抗可溶性TNF-α介导的细胞毒作用,增加NO的产生.
目的 建立高錶達跨膜型腫瘤壞死因子-α胞內段(TNF-intracellular domain,TNF-ICD)基序的人乳腺癌MCF-7細胞株,為研究TM-TNF-α的反嚮信號提供工具.方法 採用脂質體介入法將含人TNF-ICD的pIRES2-EGFP病毒載體導入MCF-7中,經鑒定、篩選穫得能穩定錶達TNF-ICD細胞株.採用MTT法檢測轉染細胞對TNF-α的敏感度,比色法檢測NO含量,ELISA方法 檢測NF-κB的活性.結果 TNF-ICD基因轉染入MCF-7細胞後錶達在細胞膜上,併能提高該細胞NF-κB活性,牴抗TNF-α的殺傷,增加其NO產生;應用NF-κB抑製劑PDTC處理後能恢複該細胞對TNF的敏感性.結論 穫得穩定錶達TNF-ICD的MCF-7細胞株,TNF-ICD可能作為TM-TNF-α細胞內的一段活化基序參與TM-TNF-α的反嚮信號,併通過活化NF-κB,牴抗可溶性TNF-α介導的細胞毒作用,增加NO的產生.
목적 건립고표체과막형종류배사인자-α포내단(TNF-intracellular domain,TNF-ICD)기서적인유선암MCF-7세포주,위연구TM-TNF-α적반향신호제공공구.방법 채용지질체개입법장함인TNF-ICD적pIRES2-EGFP병독재체도입MCF-7중,경감정、사선획득능은정표체TNF-ICD세포주.채용MTT법검측전염세포대TNF-α적민감도,비색법검측NO함량,ELISA방법 검측NF-κB적활성.결과 TNF-ICD기인전염입MCF-7세포후표체재세포막상,병능제고해세포NF-κB활성,저항TNF-α적살상,증가기NO산생;응용NF-κB억제제PDTC처리후능회복해세포대TNF적민감성.결론 획득은정표체TNF-ICD적MCF-7세포주,TNF-ICD가능작위TM-TNF-α세포내적일단활화기서삼여TM-TNF-α적반향신호,병통과활화NF-κB,저항가용성TNF-α개도적세포독작용,증가NO적산생.
