山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2008年
2期
132-135
,共4页
崔丽萍%崔晶%时昌文%孙青
崔麗萍%崔晶%時昌文%孫青
최려평%최정%시창문%손청
人端粒酶逆转录酶%慢病毒裁体%肿瘤疫苗
人耑粒酶逆轉錄酶%慢病毒裁體%腫瘤疫苗
인단립매역전록매%만병독재체%종류역묘
目的 构建编码人端粒酶逆转录酶(hTERT)的慢病毒载体,并测定其滴度,观察hTERT基因在体外的表达情况.方法 采用RT-PCR获得hTERT基因片段,插入转移栽体L166,用CaCl2法L166-hTERT、1205、1311共转染293T细胞包装慢病毒,测定病毒滴度,免疫细胞化学法检测慢病毒感染的293T细胞中hTERT的表达.结果 测序结果显示成功构建了重组质粒L166-hTERT.测定未经浓缩的病毒滴度为5.25×106 IU/mL,免疫细胞化学法检测到慢病毒感染的293T细胞中hTERT呈阳性表达.结论 成功构建了负载hTERT基因片段的慢病毒,hTERT能在感染的293T细胞中高效表达,表达持续2个月以上.
目的 構建編碼人耑粒酶逆轉錄酶(hTERT)的慢病毒載體,併測定其滴度,觀察hTERT基因在體外的錶達情況.方法 採用RT-PCR穫得hTERT基因片段,插入轉移栽體L166,用CaCl2法L166-hTERT、1205、1311共轉染293T細胞包裝慢病毒,測定病毒滴度,免疫細胞化學法檢測慢病毒感染的293T細胞中hTERT的錶達.結果 測序結果顯示成功構建瞭重組質粒L166-hTERT.測定未經濃縮的病毒滴度為5.25×106 IU/mL,免疫細胞化學法檢測到慢病毒感染的293T細胞中hTERT呈暘性錶達.結論 成功構建瞭負載hTERT基因片段的慢病毒,hTERT能在感染的293T細胞中高效錶達,錶達持續2箇月以上.
목적 구건편마인단립매역전록매(hTERT)적만병독재체,병측정기적도,관찰hTERT기인재체외적표체정황.방법 채용RT-PCR획득hTERT기인편단,삽입전이재체L166,용CaCl2법L166-hTERT、1205、1311공전염293T세포포장만병독,측정병독적도,면역세포화학법검측만병독감염적293T세포중hTERT적표체.결과 측서결과현시성공구건료중조질립L166-hTERT.측정미경농축적병독적도위5.25×106 IU/mL,면역세포화학법검측도만병독감염적293T세포중hTERT정양성표체.결론 성공구건료부재hTERT기인편단적만병독,hTERT능재감염적293T세포중고효표체,표체지속2개월이상.
