用兔IgG筛选噬菌体展示免疫球蛋白结合分子组合文库
용토IgG사선서균체전시면역구단백결합분자조합문고
Selection of a combinatorial phage library displaying immunoglobulin-binding molecules with rabbit IgG
  • 万方数据
    安徽医科大学学报 안휘의과대학학보
    ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
    2009年 2期 141-146 ,共6页

    唐萍%潘卫%曹洁%廖文婷%陈秋莉%黄德圣%庞强%王锦红%邓松华

    당평%반위%조길%료문정%진추리%황덕골%방강%왕금홍%산송화

    细菌噬菌体/遗传学%免疫球蛋白类%免疫球蛋白G 細菌噬菌體/遺傳學%免疫毬蛋白類%免疫毬蛋白G
    세균서균체/유전학%면역구단백류%면역구단백G
    目的 应用噬菌体展示免疫球蛋白(Ig)结合分子组合文库,进化筛选获得与兔IgG结合的代表性序列,测定其与兔IgG及人IgG结合活性的差异,以判断筛选获得的代表性序列对不同种属Ig的结合是否存在倾向性的差别.方法 应用包含Ig效应子结合蛋白Protein A的D结构域(PA-D)、A结构域(PA-A),Protein G的B2结构域(PG-B2)及protein L的B3结构域(PL-B3)的单结构域随机组合文库,以兔IgG对该组合文库进行进化筛选,序列比较分析筛选获得的代表性序列与人IgG进化筛选文库所得代表性序列的异同性;用ELISA和竞争抑制试验分别测定阳性噬菌体克隆与兔IgG及人IgG的结合活性.结果 以兔IgG经4轮分子进化筛选,获得在天然细菌蛋白中不存在的新的结构形式PA-A-PA-A,该结果与人IgG进化筛选所得代表性序列PA-A-PG有显著差异;兔IgG筛选序列PA-A-PA-A和人IgG筛选序列PA-A-PG分别显示出与兔Ig和人Ig结合力更强的特性.结论 该研究首次应用噬菌体展示技术研究不同种属抗体效应子构象的不同,证实兔IgG和人IgG两者效应子构象之间确实存在差异.这一结论有助于阐明抗体效应子构象在不同种属之间的差异性.
    목적 응용서균체전시면역구단백(Ig)결합분자조합문고,진화사선획득여토IgG결합적대표성서렬,측정기여토IgG급인IgG결합활성적차이,이판단사선획득적대표성서렬대불동충속Ig적결합시부존재경향성적차별.방법 응용포함Ig효응자결합단백Protein A적D결구역(PA-D)、A결구역(PA-A),Protein G적B2결구역(PG-B2)급protein L적B3결구역(PL-B3)적단결구역수궤조합문고,이토IgG대해조합문고진행진화사선,서렬비교분석사선획득적대표성서렬여인IgG진화사선문고소득대표성서렬적이동성;용ELISA화경쟁억제시험분별측정양성서균체극륭여토IgG급인IgG적결합활성.결과 이토IgG경4륜분자진화사선,획득재천연세균단백중불존재적신적결구형식PA-A-PA-A,해결과여인IgG진화사선소득대표성서렬PA-A-PG유현저차이;토IgG사선서렬PA-A-PA-A화인IgG사선서렬PA-A-PG분별현시출여토Ig화인Ig결합력경강적특성.결론 해연구수차응용서균체전시기술연구불동충속항체효응자구상적불동,증실토IgG화인IgG량자효응자구상지간학실존재차이.저일결론유조우천명항체효응자구상재불동충속지간적차이성.
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