中国中西医结合急救杂志
中國中西醫結閤急救雜誌
중국중서의결합급구잡지
INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE IN PRACTICE OF CRITICAL CARE MEDICINE
2011年
2期
82-85,前插一
,共5页
凉膈散%休克,创伤失血性%肝脏%凋亡
涼膈散%休剋,創傷失血性%肝髒%凋亡
량격산%휴극,창상실혈성%간장%조망
目的 观察凉膈散对创伤失血性休克大鼠肝脏细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 健康雄性Wistar大鼠90只,随机分为正常组,模型1、3、6、24 h组和凉膈散1、3、6、24 h组,每组10只.采用骨折后经颈动脉放血制备创伤失血性休克大鼠模型.凉膈散组于制模前连续3 d灌胃凉膈散10 ml/kg;模型组给予等量生理盐水;正常组不予任何处理.取血,采用速率法测定血浆天冬氨酸转氨酶(AST)浓度;取肝组织,用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,用免疫组化法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bax、Bcl-2、Fas、FasL的基因表达.结果 模型组1、3、6、24 h血AST(U/L)呈上升趋势,24 h达峰值(647.36±60.02),与正常组(66.69±19.95)比较差异有统计学意义(均P<0.05);凉膈散组各时间点血AST(194.24±29.53、 306.01±83.85、 388.36±92.71、 451.48±99.70)均较模型组显著降低(均P<0.05).正常组未见凋亡细胞;模型组1、6、24 h时有散在凋亡细胞,3 h时中央静脉周围肝脏实质细胞出现大量凋亡(个:20.60±0.47);凉膈散组3 h时只发现肝窦内淋巴细胞凋亡(个:14.70±1.02),较模型组显著降低(P<0.05).模型组1、3、6和24 h caspase-3 蛋白表达(×103,A值)均较正常组(8.96±1.22)显著升高,3 h达峰值(49.71±0.89);凉膈散组各时间点caspase-3表达(17.81±0.48、 34.48±1.09、 28.52±1.14、 31.76±1.39)较模型组显著下降(均P<0.05).模型组各时间点凋亡相关基因表达均较正常组升高,且Bax、Bcl-2、Fas均于3 h达峰值(1.98±0.07、0.87±0.07、0.25±0.02),FasL于6 h达峰值(0.57±0.02);凉膈散组在3 h(0.40±0.03)和6 h(0.18±0.03)能显著降低Bax基因表达(均P<0.05),对Bcl-2基因表达无明显影响(均P>0.05),且未检测到Fas和FasL基因表达.结论 凉膈散能够抑制创伤失血性休克大鼠肝脏caspase-3蛋白表达及Bax、Fas、FasL基因表达,但对肝脏Bcl-2表达无明显影响;能显著抑制肝脏实质细胞凋亡,促进肝窦内出现淋巴细胞凋亡,从而避免炎性细胞过度活化造成对组织的损伤.
目的 觀察涼膈散對創傷失血性休剋大鼠肝髒細胞凋亡的影響,併探討其機製.方法 健康雄性Wistar大鼠90隻,隨機分為正常組,模型1、3、6、24 h組和涼膈散1、3、6、24 h組,每組10隻.採用骨摺後經頸動脈放血製備創傷失血性休剋大鼠模型.涼膈散組于製模前連續3 d灌胃涼膈散10 ml/kg;模型組給予等量生理鹽水;正常組不予任何處理.取血,採用速率法測定血漿天鼕氨痠轉氨酶(AST)濃度;取肝組織,用原位末耑缺刻標記法(TUNEL)檢測凋亡細胞,用免疫組化法檢測天鼕氨痠特異性半胱氨痠蛋白酶3(caspase-3)蛋白錶達,用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測Bax、Bcl-2、Fas、FasL的基因錶達.結果 模型組1、3、6、24 h血AST(U/L)呈上升趨勢,24 h達峰值(647.36±60.02),與正常組(66.69±19.95)比較差異有統計學意義(均P<0.05);涼膈散組各時間點血AST(194.24±29.53、 306.01±83.85、 388.36±92.71、 451.48±99.70)均較模型組顯著降低(均P<0.05).正常組未見凋亡細胞;模型組1、6、24 h時有散在凋亡細胞,3 h時中央靜脈週圍肝髒實質細胞齣現大量凋亡(箇:20.60±0.47);涼膈散組3 h時隻髮現肝竇內淋巴細胞凋亡(箇:14.70±1.02),較模型組顯著降低(P<0.05).模型組1、3、6和24 h caspase-3 蛋白錶達(×103,A值)均較正常組(8.96±1.22)顯著升高,3 h達峰值(49.71±0.89);涼膈散組各時間點caspase-3錶達(17.81±0.48、 34.48±1.09、 28.52±1.14、 31.76±1.39)較模型組顯著下降(均P<0.05).模型組各時間點凋亡相關基因錶達均較正常組升高,且Bax、Bcl-2、Fas均于3 h達峰值(1.98±0.07、0.87±0.07、0.25±0.02),FasL于6 h達峰值(0.57±0.02);涼膈散組在3 h(0.40±0.03)和6 h(0.18±0.03)能顯著降低Bax基因錶達(均P<0.05),對Bcl-2基因錶達無明顯影響(均P>0.05),且未檢測到Fas和FasL基因錶達.結論 涼膈散能夠抑製創傷失血性休剋大鼠肝髒caspase-3蛋白錶達及Bax、Fas、FasL基因錶達,但對肝髒Bcl-2錶達無明顯影響;能顯著抑製肝髒實質細胞凋亡,促進肝竇內齣現淋巴細胞凋亡,從而避免炎性細胞過度活化造成對組織的損傷.
목적 관찰량격산대창상실혈성휴극대서간장세포조망적영향,병탐토기궤제.방법 건강웅성Wistar대서90지,수궤분위정상조,모형1、3、6、24 h조화량격산1、3、6、24 h조,매조10지.채용골절후경경동맥방혈제비창상실혈성휴극대서모형.량격산조우제모전련속3 d관위량격산10 ml/kg;모형조급여등량생리염수;정상조불여임하처리.취혈,채용속솔법측정혈장천동안산전안매(AST)농도;취간조직,용원위말단결각표기법(TUNEL)검측조망세포,용면역조화법검측천동안산특이성반광안산단백매3(caspase-3)단백표체,용역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측Bax、Bcl-2、Fas、FasL적기인표체.결과 모형조1、3、6、24 h혈AST(U/L)정상승추세,24 h체봉치(647.36±60.02),여정상조(66.69±19.95)비교차이유통계학의의(균P<0.05);량격산조각시간점혈AST(194.24±29.53、 306.01±83.85、 388.36±92.71、 451.48±99.70)균교모형조현저강저(균P<0.05).정상조미견조망세포;모형조1、6、24 h시유산재조망세포,3 h시중앙정맥주위간장실질세포출현대량조망(개:20.60±0.47);량격산조3 h시지발현간두내림파세포조망(개:14.70±1.02),교모형조현저강저(P<0.05).모형조1、3、6화24 h caspase-3 단백표체(×103,A치)균교정상조(8.96±1.22)현저승고,3 h체봉치(49.71±0.89);량격산조각시간점caspase-3표체(17.81±0.48、 34.48±1.09、 28.52±1.14、 31.76±1.39)교모형조현저하강(균P<0.05).모형조각시간점조망상관기인표체균교정상조승고,차Bax、Bcl-2、Fas균우3 h체봉치(1.98±0.07、0.87±0.07、0.25±0.02),FasL우6 h체봉치(0.57±0.02);량격산조재3 h(0.40±0.03)화6 h(0.18±0.03)능현저강저Bax기인표체(균P<0.05),대Bcl-2기인표체무명현영향(균P>0.05),차미검측도Fas화FasL기인표체.결론 량격산능구억제창상실혈성휴극대서간장caspase-3단백표체급Bax、Fas、FasL기인표체,단대간장Bcl-2표체무명현영향;능현저억제간장실질세포조망,촉진간두내출현림파세포조망,종이피면염성세포과도활화조성대조직적손상.
