中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2011年
9期
814-817,831
,共5页
王宏伟%陆江阳%田光%刘茜%赵敏%杨毅%康佳蕊
王宏偉%陸江暘%田光%劉茜%趙敏%楊毅%康佳蕊
왕굉위%륙강양%전광%류천%조민%양의%강가예
肺%树突状细胞%免疫磁珠%CD11c
肺%樹突狀細胞%免疫磁珠%CD11c
폐%수돌상세포%면역자주%CD11c
目的:建立肺间质树突状细胞(DCs)的分离与纯化方法,为肺间质DCs的相关研究提供实验基础.方法:雄性BALB/c小鼠肺组织经Ⅰ型胶原酶消化、密度梯度离心、CD11c+免疫磁珠分选纯化DCs,流式细胞术鉴定分选DCs纯度,倒置相差显微镜观察孵育细胞生长状态,扫描电镜和透射电镜观察DCs超微形态,流式细胞术检测肺间质DCs的CD11c、CD11b、CD86和I-Ab表型.结果:分选获得的肺间质DCs经鉴定,纯度为92.59%±5.62%,在RPMI1640培养基中生长状态良好,少数细胞形成小细胞集落.DCs超微形态观察显示细胞表面多见长1～2 μm密集的树枝状突起,细胞器不发达,细胞核形不规则.90%以上肺间质DCs为未成熟状态或前体DCs,低表达成熟标志物I-Ab和CD86,并具有异质性,近40%起源于髓系细胞分化.结论:密度梯度离心和免疫磁珠分选是分离、纯化肺间质DCs的理想方法,获得的DCs纯度高、活性好、免疫表型稳定,但操作步骤比较复杂,技术要求高.
目的:建立肺間質樹突狀細胞(DCs)的分離與純化方法,為肺間質DCs的相關研究提供實驗基礎.方法:雄性BALB/c小鼠肺組織經Ⅰ型膠原酶消化、密度梯度離心、CD11c+免疫磁珠分選純化DCs,流式細胞術鑒定分選DCs純度,倒置相差顯微鏡觀察孵育細胞生長狀態,掃描電鏡和透射電鏡觀察DCs超微形態,流式細胞術檢測肺間質DCs的CD11c、CD11b、CD86和I-Ab錶型.結果:分選穫得的肺間質DCs經鑒定,純度為92.59%±5.62%,在RPMI1640培養基中生長狀態良好,少數細胞形成小細胞集落.DCs超微形態觀察顯示細胞錶麵多見長1～2 μm密集的樹枝狀突起,細胞器不髮達,細胞覈形不規則.90%以上肺間質DCs為未成熟狀態或前體DCs,低錶達成熟標誌物I-Ab和CD86,併具有異質性,近40%起源于髓繫細胞分化.結論:密度梯度離心和免疫磁珠分選是分離、純化肺間質DCs的理想方法,穫得的DCs純度高、活性好、免疫錶型穩定,但操作步驟比較複雜,技術要求高.
목적:건립폐간질수돌상세포(DCs)적분리여순화방법,위폐간질DCs적상관연구제공실험기출.방법:웅성BALB/c소서폐조직경Ⅰ형효원매소화、밀도제도리심、CD11c+면역자주분선순화DCs,류식세포술감정분선DCs순도,도치상차현미경관찰부육세포생장상태,소묘전경화투사전경관찰DCs초미형태,류식세포술검측폐간질DCs적CD11c、CD11b、CD86화I-Ab표형.결과:분선획득적폐간질DCs경감정,순도위92.59%±5.62%,재RPMI1640배양기중생장상태량호,소수세포형성소세포집락.DCs초미형태관찰현시세포표면다견장1～2 μm밀집적수지상돌기,세포기불발체,세포핵형불규칙.90%이상폐간질DCs위미성숙상태혹전체DCs,저표체성숙표지물I-Ab화CD86,병구유이질성,근40%기원우수계세포분화.결론:밀도제도리심화면역자주분선시분리、순화폐간질DCs적이상방법,획득적DCs순도고、활성호、면역표형은정,단조작보취비교복잡,기술요구고.
