安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
23期
14098-14102
,共5页
油茶%SSR - PCR%正交设计%体系优化
油茶%SSR - PCR%正交設計%體繫優化
유다%SSR - PCR%정교설계%체계우화
[目的]优化油茶(Camellia oleifera) SSR-PCR反应体系.[方法]应用改良CTAB法提取油茶基因组DNA,采用L16(45)正交设计试验,对影响油茶SSR-PCR反应体系的5个因素(Taq聚合酶浓度、模板浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Mg2+浓度)在4水平上进行筛选.PCR结果经统计分析软件DPS分析,并对退火温度进行了摸索,确立了油茶SSR-PCR的优化体系.[结果]油茶SSR-PCR的优化体系总体积为20μl,包括Taq聚合酶量为1.0 U/20μ1,模板浓度75 ng/20 μl,dNTPs浓度为0.15 mmol/L,引物浓度为0.40μmoL/L,Mg2+浓度为1.50 mmol/L,退火温度为50℃.[结论]该研究确定的优化体系可以为油茶资源遗传多样性分析奠定技术基础.
[目的]優化油茶(Camellia oleifera) SSR-PCR反應體繫.[方法]應用改良CTAB法提取油茶基因組DNA,採用L16(45)正交設計試驗,對影響油茶SSR-PCR反應體繫的5箇因素(Taq聚閤酶濃度、模闆濃度、dNTPs濃度、引物濃度和Mg2+濃度)在4水平上進行篩選.PCR結果經統計分析軟件DPS分析,併對退火溫度進行瞭摸索,確立瞭油茶SSR-PCR的優化體繫.[結果]油茶SSR-PCR的優化體繫總體積為20μl,包括Taq聚閤酶量為1.0 U/20μ1,模闆濃度75 ng/20 μl,dNTPs濃度為0.15 mmol/L,引物濃度為0.40μmoL/L,Mg2+濃度為1.50 mmol/L,退火溫度為50℃.[結論]該研究確定的優化體繫可以為油茶資源遺傳多樣性分析奠定技術基礎.
[목적]우화유다(Camellia oleifera) SSR-PCR반응체계.[방법]응용개량CTAB법제취유다기인조DNA,채용L16(45)정교설계시험,대영향유다SSR-PCR반응체계적5개인소(Taq취합매농도、모판농도、dNTPs농도、인물농도화Mg2+농도)재4수평상진행사선.PCR결과경통계분석연건DPS분석,병대퇴화온도진행료모색,학립료유다SSR-PCR적우화체계.[결과]유다SSR-PCR적우화체계총체적위20μl,포괄Taq취합매량위1.0 U/20μ1,모판농도75 ng/20 μl,dNTPs농도위0.15 mmol/L,인물농도위0.40μmoL/L,Mg2+농도위1.50 mmol/L,퇴화온도위50℃.[결론]해연구학정적우화체계가이위유다자원유전다양성분석전정기술기출.
