内蒙古农业大学学报(自然科学版)
內矇古農業大學學報(自然科學版)
내몽고농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF INNER MONGOLIA AGRICULTURAL UNIIVERSITY
2011年
3期
27-31
,共5页
代霄燕%许丽萍%白文成%韩润林
代霄燕%許麗萍%白文成%韓潤林
대소연%허려평%백문성%한윤림
三磷酸甘油醛脱氢酶%A群链球菌%纤溶酶原%脂蛋白(a)%赖氨酸结合位点
三燐痠甘油醛脫氫酶%A群鏈毬菌%纖溶酶原%脂蛋白(a)%賴氨痠結閤位點
삼린산감유철탈경매%A군련구균%섬용매원%지단백(a)%뢰안산결합위점
三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是A群链球菌(group A Streptococcus,GAS)表面的纤溶酶原(Plg)受体之一,其C末端的赖氨酸残基可以与Plg的赖氨酸结合位点(LBS)相结合.脂蛋白(a)[Lp(a)]中的载脂蛋白(a)[Apu(a)]与Plg有很高的同源性.因此本实验室提出了Lp(a)可能与GAS表面的Plg受体相结合,进而可能竞争性抑制GAS与Plg结合的假说.本研究克隆了GAS的GAPDH及其C末端敲除赖氨酸残基的突变体基因,酶切后将其连接到表达载体pASK - IBA37中,并在大肠杆菌BL -21中表达了这两个重组蛋白(rGAPDH和rGAPDH△345).通过酶联免疫吸附试验(ELISA)对rGAPDH和rGAPDH△345与Lp(a)的相互作用机制进行了研究.结果表明rGAPDH△345与Lp(a)的结合值比rGAPDH显著降低,说明rGAPDH及rGAPDH△345与Lp(a)通过LBS发生特异性结合,而且一定浓度的赖氨酸类似物6-氨基已酸(EACA)可以抑制这种结合,Lp(a)对rGAPDH与Pig的相互作用也有明显的抑制.
三燐痠甘油醛脫氫酶(GAPDH)是A群鏈毬菌(group A Streptococcus,GAS)錶麵的纖溶酶原(Plg)受體之一,其C末耑的賴氨痠殘基可以與Plg的賴氨痠結閤位點(LBS)相結閤.脂蛋白(a)[Lp(a)]中的載脂蛋白(a)[Apu(a)]與Plg有很高的同源性.因此本實驗室提齣瞭Lp(a)可能與GAS錶麵的Plg受體相結閤,進而可能競爭性抑製GAS與Plg結閤的假說.本研究剋隆瞭GAS的GAPDH及其C末耑敲除賴氨痠殘基的突變體基因,酶切後將其連接到錶達載體pASK - IBA37中,併在大腸桿菌BL -21中錶達瞭這兩箇重組蛋白(rGAPDH和rGAPDH△345).通過酶聯免疫吸附試驗(ELISA)對rGAPDH和rGAPDH△345與Lp(a)的相互作用機製進行瞭研究.結果錶明rGAPDH△345與Lp(a)的結閤值比rGAPDH顯著降低,說明rGAPDH及rGAPDH△345與Lp(a)通過LBS髮生特異性結閤,而且一定濃度的賴氨痠類似物6-氨基已痠(EACA)可以抑製這種結閤,Lp(a)對rGAPDH與Pig的相互作用也有明顯的抑製.
삼린산감유철탈경매(GAPDH)시A군련구균(group A Streptococcus,GAS)표면적섬용매원(Plg)수체지일,기C말단적뢰안산잔기가이여Plg적뢰안산결합위점(LBS)상결합.지단백(a)[Lp(a)]중적재지단백(a)[Apu(a)]여Plg유흔고적동원성.인차본실험실제출료Lp(a)가능여GAS표면적Plg수체상결합,진이가능경쟁성억제GAS여Plg결합적가설.본연구극륭료GAS적GAPDH급기C말단고제뢰안산잔기적돌변체기인,매절후장기련접도표체재체pASK - IBA37중,병재대장간균BL -21중표체료저량개중조단백(rGAPDH화rGAPDH△345).통과매련면역흡부시험(ELISA)대rGAPDH화rGAPDH△345여Lp(a)적상호작용궤제진행료연구.결과표명rGAPDH△345여Lp(a)적결합치비rGAPDH현저강저,설명rGAPDH급rGAPDH△345여Lp(a)통과LBS발생특이성결합,이차일정농도적뢰안산유사물6-안기이산(EACA)가이억제저충결합,Lp(a)대rGAPDH여Pig적상호작용야유명현적억제.