CAJ | 학술논문

目的:建立气液界面培养体外构建兔角膜上皮的方法.评价体外构建角膜上皮的生物学特性.方法:新西兰白兔15只30只眼,取角膜缘上皮组织.组织块接种原代培养.细胞融合生长后,消化传代.以去上皮细胞人羊膜组织为载体,接种培养传代细胞,细胞融合后,用气液界面培养方法继续培养2周.倒置显微镜对体外构建的角膜上皮进行观察.培养细胞膜片固定,苏木精-伊红(HE)染色;AE1细胞角蛋白单克隆抗体免疫组化染色,光镜观察.常规制作电镜标本,透射电镜观察.以传统培养方法作为对照.结果:倒置显微镜观察,气液界面培养可以形成连续的上皮细胞层,细胞和载体之间连接较牢固.HE染色显示体外构建的角膜上皮具有复层扁平上皮的结构.免疫组化染色有较高的阳性率.透射电镜观察细胞之间有丰富的桥粒样连接.结论:气液界面培养方法可以构建复层鳞状角膜上皮.与传统培养方法比较,构建的角膜上皮组织具有较优越的生物学特性.
목적:건립기액계면배양체외구건토각막상피적방법.평개체외구건각막상피적생물학특성.방법:신서란백토15지30지안,취각막연상피조직.조직괴접충원대배양.세포융합생장후,소화전대.이거상피세포인양막조직위재체,접충배양전대세포,세포융합후,용기액계면배양방법계속배양2주.도치현미경대체외구건적각막상피진행관찰.배양세포막편고정,소목정-이홍(HE)염색;AE1세포각단백단극륭항체면역조화염색,광경관찰.상규제작전경표본,투사전경관찰.이전통배양방법작위대조.결과:도치현미경관찰,기액계면배양가이형성련속적상피세포층,세포화재체지간련접교뢰고.HE염색현시체외구건적각막상피구유복층편평상피적결구.면역조화염색유교고적양성솔.투사전경관찰세포지간유봉부적교립양련접.결론:기액계면배양방법가이구건복층린상각막상피.여전통배양방법비교,구건적각막상피조직구유교우월적생물학특성.