中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2005年
3期
244-246,329
,共4页
申会刚%周继勇%陈庆新%郭军庆%陈婷飞%商绍彬%李增魁
申會剛%週繼勇%陳慶新%郭軍慶%陳婷飛%商紹彬%李增魁
신회강%주계용%진경신%곽군경%진정비%상소빈%리증괴
猪圆环病毒Ⅱ型%Rep基因%真核表达
豬圓環病毒Ⅱ型%Rep基因%真覈錶達
저원배병독Ⅱ형%Rep기인%진핵표체
为研究猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因在PK15细胞中的表达特性,通过PCR方法克隆了PCV2杭州株(HZ0201)Rep基因全长945 bp片段,与真核表达载体pCI-neo构建为重组质粒pCI-PCV2-Rep.pCI-PCV2-Rep质粒转染PK15细胞后48 h,通过RT-PCR可检测到PCV2 Rep mRNA的转录;用猪PCV2多抗血清作间接免疫荧光试验,可检测到Rep基因表达产物.在表达量低的细胞中,PCV2 Rep蛋白主要位于PK15的细胞浆,在表达量高的细胞中,细胞浆和细胞核中均含有大量的Rep蛋白,表明Rep对PK15细胞的细胞浆和细胞核的亲嗜性没有明显差别.
為研究豬圓環病毒Ⅱ型(PCV2)Rep基因在PK15細胞中的錶達特性,通過PCR方法剋隆瞭PCV2杭州株(HZ0201)Rep基因全長945 bp片段,與真覈錶達載體pCI-neo構建為重組質粒pCI-PCV2-Rep.pCI-PCV2-Rep質粒轉染PK15細胞後48 h,通過RT-PCR可檢測到PCV2 Rep mRNA的轉錄;用豬PCV2多抗血清作間接免疫熒光試驗,可檢測到Rep基因錶達產物.在錶達量低的細胞中,PCV2 Rep蛋白主要位于PK15的細胞漿,在錶達量高的細胞中,細胞漿和細胞覈中均含有大量的Rep蛋白,錶明Rep對PK15細胞的細胞漿和細胞覈的親嗜性沒有明顯差彆.
위연구저원배병독Ⅱ형(PCV2)Rep기인재PK15세포중적표체특성,통과PCR방법극륭료PCV2항주주(HZ0201)Rep기인전장945 bp편단,여진핵표체재체pCI-neo구건위중조질립pCI-PCV2-Rep.pCI-PCV2-Rep질립전염PK15세포후48 h,통과RT-PCR가검측도PCV2 Rep mRNA적전록;용저PCV2다항혈청작간접면역형광시험,가검측도Rep기인표체산물.재표체량저적세포중,PCV2 Rep단백주요위우PK15적세포장,재표체량고적세포중,세포장화세포핵중균함유대량적Rep단백,표명Rep대PK15세포적세포장화세포핵적친기성몰유명현차별.
