华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2007年
2期
107-109
,共3页
林锋强%胡奇林%陈少莺%欧阳岁东%陈仕龙%朱小丽%程晓霞
林鋒彊%鬍奇林%陳少鶯%歐暘歲東%陳仕龍%硃小麗%程曉霞
림봉강%호기림%진소앵%구양세동%진사룡%주소려%정효하
半套式RT-PCR%诊断%番鸭呼肠孤病毒
半套式RT-PCR%診斷%番鴨呼腸孤病毒
반투식RT-PCR%진단%번압호장고병독
参考GenBank中番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列设计并合成3条引物C1、HP11和HP12,组成半套式RT-PCR,扩增片段为300 bp.应用该半套式RT-PCR对MDRV、禽呼肠孤病毒(ARV)、番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸡胚成纤维细胞(CEF)和番鸭胚成纤维细胞(MDEF)培养物进行扩增.结果仅能从MDRV中扩增出300 bp特异片段,而不能从ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF细胞培养物中扩增出特异片段;该方法检测灵敏度为1 fg核酸,重复性好.对人工感染和临床疑似病例用病毒分离和半套式RT-PCR进行检测,2种方法符合率为100%.因此,该半套式RT-PCR可以用于番鸭呼肠孤病毒病的临床快速检测.
參攷GenBank中番鴨呼腸孤病毒(muscovy duck reovirus,MDRV)S1基因序列設計併閤成3條引物C1、HP11和HP12,組成半套式RT-PCR,擴增片段為300 bp.應用該半套式RT-PCR對MDRV、禽呼腸孤病毒(ARV)、番鴨細小病毒(MPV)、鵝細小病毒(GPV)、鷄胚成纖維細胞(CEF)和番鴨胚成纖維細胞(MDEF)培養物進行擴增.結果僅能從MDRV中擴增齣300 bp特異片段,而不能從ARV、MPV、GPV、CEF和MDEF細胞培養物中擴增齣特異片段;該方法檢測靈敏度為1 fg覈痠,重複性好.對人工感染和臨床疑似病例用病毒分離和半套式RT-PCR進行檢測,2種方法符閤率為100%.因此,該半套式RT-PCR可以用于番鴨呼腸孤病毒病的臨床快速檢測.
삼고GenBank중번압호장고병독(muscovy duck reovirus,MDRV)S1기인서렬설계병합성3조인물C1、HP11화HP12,조성반투식RT-PCR,확증편단위300 bp.응용해반투식RT-PCR대MDRV、금호장고병독(ARV)、번압세소병독(MPV)、아세소병독(GPV)、계배성섬유세포(CEF)화번압배성섬유세포(MDEF)배양물진행확증.결과부능종MDRV중확증출300 bp특이편단,이불능종ARV、MPV、GPV、CEF화MDEF세포배양물중확증출특이편단;해방법검측령민도위1 fg핵산,중복성호.대인공감염화림상의사병례용병독분리화반투식RT-PCR진행검측,2충방법부합솔위100%.인차,해반투식RT-PCR가이용우번압호장고병독병적림상쾌속검측.
