食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2007年
5期
203-207
,共5页
李丽%吴柘%郭道森%汪靖超%李荣贵
李麗%吳柘%郭道森%汪靖超%李榮貴
리려%오자%곽도삼%왕정초%리영귀
Erwinia uredovora%crtY%番茄红素环化酶%纯化%活性
Erwinia uredovora%crtY%番茄紅素環化酶%純化%活性
Erwinia uredovora%crtY%번가홍소배화매%순화%활성
噬夏孢欧文氏菌(Erwinia uredovora)可以累积类胡萝卜素,合成过程涉及的一系列反应都是在相关酶的催化下完成的,其中番茄红素环化酶由基因crtY编码,催化由番茄红素转化为β-胡萝卜素的酶促反应.本研究以噬夏孢欧文氏菌基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应扩增获得crtY基因,测序正确后克隆进表达载体pET-15b,构建表达质粒pET-15b-crtY,重组质粒转化E.coli BL21(DE3),构建工程菌,经IPTG诱导后,重组番茄红素环化酶在大肠杆菌中实现了高效表达,通过镍离子树脂亲和层析和Superdex 75凝胶过滤层析,得到了电泳纯的重组噬夏孢欧文氏菌番茄红素环化酶,该蛋白体外具有催化番茄红素转化为β-胡萝卜素的活性.
噬夏孢歐文氏菌(Erwinia uredovora)可以纍積類鬍蘿蔔素,閤成過程涉及的一繫列反應都是在相關酶的催化下完成的,其中番茄紅素環化酶由基因crtY編碼,催化由番茄紅素轉化為β-鬍蘿蔔素的酶促反應.本研究以噬夏孢歐文氏菌基因組DNA為模闆,通過聚閤酶鏈式反應擴增穫得crtY基因,測序正確後剋隆進錶達載體pET-15b,構建錶達質粒pET-15b-crtY,重組質粒轉化E.coli BL21(DE3),構建工程菌,經IPTG誘導後,重組番茄紅素環化酶在大腸桿菌中實現瞭高效錶達,通過鎳離子樹脂親和層析和Superdex 75凝膠過濾層析,得到瞭電泳純的重組噬夏孢歐文氏菌番茄紅素環化酶,該蛋白體外具有催化番茄紅素轉化為β-鬍蘿蔔素的活性.
서하포구문씨균(Erwinia uredovora)가이루적류호라복소,합성과정섭급적일계렬반응도시재상관매적최화하완성적,기중번가홍소배화매유기인crtY편마,최화유번가홍소전화위β-호라복소적매촉반응.본연구이서하포구문씨균기인조DNA위모판,통과취합매련식반응확증획득crtY기인,측서정학후극륭진표체재체pET-15b,구건표체질립pET-15b-crtY,중조질립전화E.coli BL21(DE3),구건공정균,경IPTG유도후,중조번가홍소배화매재대장간균중실현료고효표체,통과얼리자수지친화층석화Superdex 75응효과려층석,득도료전영순적중조서하포구문씨균번가홍소배화매,해단백체외구유최화번가홍소전화위β-호라복소적활성.
