肿瘤学杂志
腫瘤學雜誌
종류학잡지
JOURNAL OF ONCOLOGY
2008年
4期
307-309
,共3页
基因,肿瘤抑制%FHIT基因%遗传载体
基因,腫瘤抑製%FHIT基因%遺傳載體
기인,종류억제%FHIT기인%유전재체
[目的]构建人抑癌基因FHIT真核细胞表达载体.[方法]采用PCR方法,从人胎脑组织的总cDNA中扩增出444bp的人FHIT cDNA片段,然后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1/mye-His(-)B中,用限制性内切酶EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;用该表达质粒转染COS-7细胞,Western blot法检测FHIT蛋白的表达情况.[结果]人FHIT基因cDNA以正确方向插入到真核细胞表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B中;转染COS-7细胞后,可见转染细胞有Fhit蛋白的表达.[结论]本实验成功地构建了人抑癌基因FHIT的真核表达质粒peDNA3.1/myc-His(-)B-FHIT,为研究FHIT基因在肿瘤的发生中的作用提供了有效的工具.
[目的]構建人抑癌基因FHIT真覈細胞錶達載體.[方法]採用PCR方法,從人胎腦組織的總cDNA中擴增齣444bp的人FHIT cDNA片段,然後定嚮剋隆到真覈細胞錶達載體pcDNA3.1/mye-His(-)B中,用限製性內切酶EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ雙酶切後酶切分析和DNA序列分析鑒定重組質粒;用該錶達質粒轉染COS-7細胞,Western blot法檢測FHIT蛋白的錶達情況.[結果]人FHIT基因cDNA以正確方嚮插入到真覈細胞錶達載體pcDNA3.1/myc-His(-)B中;轉染COS-7細胞後,可見轉染細胞有Fhit蛋白的錶達.[結論]本實驗成功地構建瞭人抑癌基因FHIT的真覈錶達質粒peDNA3.1/myc-His(-)B-FHIT,為研究FHIT基因在腫瘤的髮生中的作用提供瞭有效的工具.
[목적]구건인억암기인FHIT진핵세포표체재체.[방법]채용PCR방법,종인태뇌조직적총cDNA중확증출444bp적인FHIT cDNA편단,연후정향극륭도진핵세포표체재체pcDNA3.1/mye-His(-)B중,용한제성내절매EcoR Ⅰ화BamH Ⅰ쌍매절후매절분석화DNA서렬분석감정중조질립;용해표체질립전염COS-7세포,Western blot법검측FHIT단백적표체정황.[결과]인FHIT기인cDNA이정학방향삽입도진핵세포표체재체pcDNA3.1/myc-His(-)B중;전염COS-7세포후,가견전염세포유Fhit단백적표체.[결론]본실험성공지구건료인억암기인FHIT적진핵표체질립peDNA3.1/myc-His(-)B-FHIT,위연구FHIT기인재종류적발생중적작용제공료유효적공구.
