郑州大学学报（医学版）
鄭州大學學報（醫學版）
정주대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
6期
1111-1114
,共4页
阳离子脂质体%基因转移%寡脱氧核糖核苷酸%视网膜色素上皮细胞%人
暘離子脂質體%基因轉移%寡脫氧覈糖覈苷痠%視網膜色素上皮細胞%人
양리자지질체%기인전이%과탈양핵당핵감산%시망막색소상피세포%인
目的:观察阳离子脂质体LipofectamineTM 2000 介导的寡脱氧核糖核苷酸(ODNs)在体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞中的转染效率及其在细胞中的分布.方法:在阳离子脂质体LipofectamineTM 2000的介导下将人工合成的FAM荧光标记的ODNs转入人RPE细胞中,荧光显微镜下观察转染后20 min、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h其在细胞内的分布,流式细胞仪检测其在RPE细胞中的转染效率;并用MTT法检测脂质体处理组、脂质体-ODNs复合物处理组和正常对照组的细胞增生活性,观察脂质体的毒性.结果:LipofectamineTM 2000能迅速将FAM-ODNs转入人RPE细胞的胞质和胞核内,4～6 h达高峰,转染效率高达(85.85±5.75)%,与其他时点比较差异有统计学意义(P<0.05),24 h后其转染率还有(70.11±5.81)%;且脂质体对RPE细胞无明显细胞毒性,3组间细胞增生活性比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:LipofectamineTM 2000能有效地将FAM-ODNs转入人RPE细胞中,可作为一种安全有效的基因转移载体用于基因治疗.
目的:觀察暘離子脂質體LipofectamineTM 2000 介導的寡脫氧覈糖覈苷痠(ODNs)在體外培養的人視網膜色素上皮(RPE)細胞中的轉染效率及其在細胞中的分佈.方法:在暘離子脂質體LipofectamineTM 2000的介導下將人工閤成的FAM熒光標記的ODNs轉入人RPE細胞中,熒光顯微鏡下觀察轉染後20 min、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h其在細胞內的分佈,流式細胞儀檢測其在RPE細胞中的轉染效率;併用MTT法檢測脂質體處理組、脂質體-ODNs複閤物處理組和正常對照組的細胞增生活性,觀察脂質體的毒性.結果:LipofectamineTM 2000能迅速將FAM-ODNs轉入人RPE細胞的胞質和胞覈內,4～6 h達高峰,轉染效率高達(85.85±5.75)%,與其他時點比較差異有統計學意義(P<0.05),24 h後其轉染率還有(70.11±5.81)%;且脂質體對RPE細胞無明顯細胞毒性,3組間細胞增生活性比較,差異無統計學意義(P>0.05).結論:LipofectamineTM 2000能有效地將FAM-ODNs轉入人RPE細胞中,可作為一種安全有效的基因轉移載體用于基因治療.
목적:관찰양리자지질체LipofectamineTM 2000 개도적과탈양핵당핵감산(ODNs)재체외배양적인시망막색소상피(RPE)세포중적전염효솔급기재세포중적분포.방법:재양리자지질체LipofectamineTM 2000적개도하장인공합성적FAM형광표기적ODNs전입인RPE세포중,형광현미경하관찰전염후20 min、1 h、2 h、4 h、6 h、12 h、24 h기재세포내적분포,류식세포의검측기재RPE세포중적전염효솔;병용MTT법검측지질체처리조、지질체-ODNs복합물처리조화정상대조조적세포증생활성,관찰지질체적독성.결과:LipofectamineTM 2000능신속장FAM-ODNs전입인RPE세포적포질화포핵내,4～6 h체고봉,전염효솔고체(85.85±5.75)%,여기타시점비교차이유통계학의의(P<0.05),24 h후기전염솔환유(70.11±5.81)%;차지질체대RPE세포무명현세포독성,3조간세포증생활성비교,차이무통계학의의(P>0.05).결론:LipofectamineTM 2000능유효지장FAM-ODNs전입인RPE세포중,가작위일충안전유효적기인전이재체용우기인치료.
