华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2010年
4期
461-465
,共5页
细胞凋亡%自噬%自身免疫调节因子%LC3B蛋白
細胞凋亡%自噬%自身免疫調節因子%LC3B蛋白
세포조망%자서%자신면역조절인자%LC3B단백
目的 探讨自身免疫调节因子(AIRE)对THP-1单核细胞凋亡的影响及其可能的分子机制.方法 将THP-1细胞以佛波醇酯(PMA)诱导分化后,进行瞬时转染.免疫荧光和Western blot法检测转染效率.通过Annexin Ⅴ-FITC、PI双染色法和流式细胞仪检测过表达AIRE的THP-1细胞凋亡率.通过间接免疫荧光染色和Western blot检测自噬蛋白LC3B的表达.结果 PMA诱导后,THP-1细胞贴壁生长,形态多样,胞质内可见空泡、吞噬细胞碎片等典型成熟分化形态.转染48 h后,THP-1细胞的AIRE蛋白呈现明显高表达.对比空载体转染和阴性对照,过表达AIRE使THP-1细胞的凋亡率上升;同时,Western blot显示LC3B-Ⅱ的蛋白水平也较空载体转染组增高,且间接免疫荧光染色提示单个细胞的阳性LC3B-Ⅱ斑点数目较空载体转染组明显增加(P＜0.05).结论 AIRE可能通过上调THP-1细胞的自噬促进其凋亡.
目的 探討自身免疫調節因子(AIRE)對THP-1單覈細胞凋亡的影響及其可能的分子機製.方法 將THP-1細胞以彿波醇酯(PMA)誘導分化後,進行瞬時轉染.免疫熒光和Western blot法檢測轉染效率.通過Annexin Ⅴ-FITC、PI雙染色法和流式細胞儀檢測過錶達AIRE的THP-1細胞凋亡率.通過間接免疫熒光染色和Western blot檢測自噬蛋白LC3B的錶達.結果 PMA誘導後,THP-1細胞貼壁生長,形態多樣,胞質內可見空泡、吞噬細胞碎片等典型成熟分化形態.轉染48 h後,THP-1細胞的AIRE蛋白呈現明顯高錶達.對比空載體轉染和陰性對照,過錶達AIRE使THP-1細胞的凋亡率上升;同時,Western blot顯示LC3B-Ⅱ的蛋白水平也較空載體轉染組增高,且間接免疫熒光染色提示單箇細胞的暘性LC3B-Ⅱ斑點數目較空載體轉染組明顯增加(P＜0.05).結論 AIRE可能通過上調THP-1細胞的自噬促進其凋亡.
목적 탐토자신면역조절인자(AIRE)대THP-1단핵세포조망적영향급기가능적분자궤제.방법 장THP-1세포이불파순지(PMA)유도분화후,진행순시전염.면역형광화Western blot법검측전염효솔.통과Annexin Ⅴ-FITC、PI쌍염색법화류식세포의검측과표체AIRE적THP-1세포조망솔.통과간접면역형광염색화Western blot검측자서단백LC3B적표체.결과 PMA유도후,THP-1세포첩벽생장,형태다양,포질내가견공포、탄서세포쇄편등전형성숙분화형태.전염48 h후,THP-1세포적AIRE단백정현명현고표체.대비공재체전염화음성대조,과표체AIRE사THP-1세포적조망솔상승;동시,Western blot현시LC3B-Ⅱ적단백수평야교공재체전염조증고,차간접면역형광염색제시단개세포적양성LC3B-Ⅱ반점수목교공재체전염조명현증가(P＜0.05).결론 AIRE가능통과상조THP-1세포적자서촉진기조망.
