扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2011年
2期
11-15,35
,共6页
彭金彪%韩宏晓%洪炀%王欣之%石耀军%傅志强%刘金明%林矫矫
彭金彪%韓宏曉%洪煬%王訢之%石耀軍%傅誌彊%劉金明%林矯矯
팽금표%한굉효%홍양%왕흔지%석요군%부지강%류금명%림교교
日本血吸虫%mago nashi基因%克隆表达%免疫保护效果
日本血吸蟲%mago nashi基因%剋隆錶達%免疫保護效果
일본혈흡충%mago nashi기인%극륭표체%면역보호효과
以日本血吸虫18 d虫体的cDNA为模板,PCR获得影mago nashi编码基因的全长cDNA,其开放阅读框为441 bp,将该序列提交至NCBI,登录号为GQ403668；应用荧光实时定量PCR分析该基因在日本血吸虫不同发育阶段虫体的表达情况.结果表明:该基因在不同发育阶段均有表达,在13日龄童虫表达量相对最高,32日龄次之；在不同性别成虫虫体中,该基因在雄虫的表达量远高于雌虫,说明该基因为日本血吸虫性别发育差异基因.以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,在大肠杆菌中表达,表达产物分子质量为19.5 ku,并以Ni-NTA HisBind Resin纯化重组蛋白.Western blotting试验显示该重组蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫试验中,与空白对照组比较,免疫组小鼠获得25.94%的减虫率和30.01%的肝脏减卵率.
以日本血吸蟲18 d蟲體的cDNA為模闆,PCR穫得影mago nashi編碼基因的全長cDNA,其開放閱讀框為441 bp,將該序列提交至NCBI,登錄號為GQ403668；應用熒光實時定量PCR分析該基因在日本血吸蟲不同髮育階段蟲體的錶達情況.結果錶明:該基因在不同髮育階段均有錶達,在13日齡童蟲錶達量相對最高,32日齡次之；在不同性彆成蟲蟲體中,該基因在雄蟲的錶達量遠高于雌蟲,說明該基因為日本血吸蟲性彆髮育差異基因.以pET28a(+)為載體構建重組錶達質粒,在大腸桿菌中錶達,錶達產物分子質量為19.5 ku,併以Ni-NTA HisBind Resin純化重組蛋白.Western blotting試驗顯示該重組蛋白具有良好的抗原性,在小鼠免疫試驗中,與空白對照組比較,免疫組小鼠穫得25.94%的減蟲率和30.01%的肝髒減卵率.
이일본혈흡충18 d충체적cDNA위모판,PCR획득영mago nashi편마기인적전장cDNA,기개방열독광위441 bp,장해서렬제교지NCBI,등록호위GQ403668；응용형광실시정량PCR분석해기인재일본혈흡충불동발육계단충체적표체정황.결과표명:해기인재불동발육계단균유표체,재13일령동충표체량상대최고,32일령차지；재불동성별성충충체중,해기인재웅충적표체량원고우자충,설명해기인위일본혈흡충성별발육차이기인.이pET28a(+)위재체구건중조표체질립,재대장간균중표체,표체산물분자질량위19.5 ku,병이Ni-NTA HisBind Resin순화중조단백.Western blotting시험현시해중조단백구유량호적항원성,재소서면역시험중,여공백대조조비교,면역조소서획득25.94%적감충솔화30.01%적간장감란솔.
