人α-乳白蛋白质基因的克隆及其在奶山羊胎儿成纤维细胞中的表达
인α-유백단백질기인적극륭급기재내산양태인성섬유세포중적표체
Cloning of human alpha-lactalbumin gene and its expression in dairy goat fetal fibroblasts
  • 万方数据
    江苏农业学报 강소농업학보
    JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
    2012年 3期 581-585 ,共5页

    苏磊%曹少先%丰秀静%田石%孟春花%王慧利%张庆晓%王锋

    소뢰%조소선%봉수정%전석%맹춘화%왕혜리%장경효%왕봉

    人α-乳白蛋白质%基因克隆%奶山羊胎儿成纤维细胞%表达 人α-乳白蛋白質%基因剋隆%奶山羊胎兒成纖維細胞%錶達
    인α-유백단백질%기인극륭%내산양태인성섬유세포%표체
    采用PCR方法从人类基因组DNA中扩增hα-LA基因,将扩增产物克隆到pMD19-T载体,并进行测序验证.通过双酶切法将测序正确的hα-LA亚克隆至真核表达载体pCEP4,构建真核表达载体pCLA并进行酶切鉴定.用脂质体法将pCLA转染至奶山羊胎儿成纤维细胞中,用RT-PCR法检测细胞中hα-LA基因mRNA的表达,用Western-bloning法检测培养上清液中hα-LA蛋白质的表达.结果显示:克隆的hα-LA基因序列完全正确,pCLA酶切鉴定正确,RT-PCR检测到转染细胞中hα-LA基因mRNA的表达,Western-blotting检测到转染细胞培养上清液中hα-LA蛋白质.表明所克隆的hα-LA基因组DNA能够在奶山羊胎儿成纤维细胞中正确转录和翻译.
    채용PCR방법종인류기인조DNA중확증hα-LA기인,장확증산물극륭도pMD19-T재체,병진행측서험증.통과쌍매절법장측서정학적hα-LA아극륭지진핵표체재체pCEP4,구건진핵표체재체pCLA병진행매절감정.용지질체법장pCLA전염지내산양태인성섬유세포중,용RT-PCR법검측세포중hα-LA기인mRNA적표체,용Western-bloning법검측배양상청액중hα-LA단백질적표체.결과현시:극륭적hα-LA기인서렬완전정학,pCLA매절감정정학,RT-PCR검측도전염세포중hα-LA기인mRNA적표체,Western-blotting검측도전염세포배양상청액중hα-LA단백질.표명소극륭적hα-LA기인조DNA능구재내산양태인성섬유세포중정학전록화번역.
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