江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
5期
991-998
,共8页
孙洋%柏立新%张永军%肖留斌%谭永安%盛洋
孫洋%柏立新%張永軍%肖留斌%譚永安%盛洋
손양%백립신%장영군%초류빈%담영안%성양
绿盲蝽%丝氨酸蛋白酶%表达谱分析%寄主%Bt棉
綠盲蝽%絲氨痠蛋白酶%錶達譜分析%寄主%Bt棉
록맹춘%사안산단백매%표체보분석%기주%Bt면
从绿盲蝽成虫体内克隆了1个丝氨酸蛋白酶基因,命名为AlSP3(GenBank序列号JQ609681).经序列分析,该基因开放阅读框长1041 bp,编码346个氨基酸,预测分子量为3.872×104,理论等电点为9.35,N-末端疏水区包含有19个氨基酸组成的信号肽.蛋白质特征分析结果表明,该基因翻译后的蛋白质具有丝氨酸蛋白酶的典型特征.利用荧光定量PCR技术对绿盲蝽取食不同寄主植物后AlSP3基因的表达谱进行分析,结果表明:相对于其他寄主植物,雌成虫取食转Bt基因棉花后AlSP3基因的表达量最高,比对照上升了11.62倍,并显著高于取食常规棉(P＜0.01);雌成虫取食常规棉后,AlSP3基因的表达量上升了6.42倍,仅次于取食Bt棉和豇豆,并显著高于取食其他寄主植物(P＜0.01).雄成虫取食常规棉后,AlSP3基因的表达水平仅次于取食蚕豆,上升了9.37倍,并显著高于取食Bt棉(P＜0.01).由此可见,AlSP3基因是绿盲蝽成虫取食常规棉后的重要消化酶基因,并对雌成虫适应取食Bt棉具有重要作用.
從綠盲蝽成蟲體內剋隆瞭1箇絲氨痠蛋白酶基因,命名為AlSP3(GenBank序列號JQ609681).經序列分析,該基因開放閱讀框長1041 bp,編碼346箇氨基痠,預測分子量為3.872×104,理論等電點為9.35,N-末耑疏水區包含有19箇氨基痠組成的信號肽.蛋白質特徵分析結果錶明,該基因翻譯後的蛋白質具有絲氨痠蛋白酶的典型特徵.利用熒光定量PCR技術對綠盲蝽取食不同寄主植物後AlSP3基因的錶達譜進行分析,結果錶明:相對于其他寄主植物,雌成蟲取食轉Bt基因棉花後AlSP3基因的錶達量最高,比對照上升瞭11.62倍,併顯著高于取食常規棉(P＜0.01);雌成蟲取食常規棉後,AlSP3基因的錶達量上升瞭6.42倍,僅次于取食Bt棉和豇豆,併顯著高于取食其他寄主植物(P＜0.01).雄成蟲取食常規棉後,AlSP3基因的錶達水平僅次于取食蠶豆,上升瞭9.37倍,併顯著高于取食Bt棉(P＜0.01).由此可見,AlSP3基因是綠盲蝽成蟲取食常規棉後的重要消化酶基因,併對雌成蟲適應取食Bt棉具有重要作用.
종록맹춘성충체내극륭료1개사안산단백매기인,명명위AlSP3(GenBank서렬호JQ609681).경서렬분석,해기인개방열독광장1041 bp,편마346개안기산,예측분자량위3.872×104,이론등전점위9.35,N-말단소수구포함유19개안기산조성적신호태.단백질특정분석결과표명,해기인번역후적단백질구유사안산단백매적전형특정.이용형광정량PCR기술대록맹춘취식불동기주식물후AlSP3기인적표체보진행분석,결과표명:상대우기타기주식물,자성충취식전Bt기인면화후AlSP3기인적표체량최고,비대조상승료11.62배,병현저고우취식상규면(P＜0.01);자성충취식상규면후,AlSP3기인적표체량상승료6.42배,부차우취식Bt면화강두,병현저고우취식기타기주식물(P＜0.01).웅성충취식상규면후,AlSP3기인적표체수평부차우취식잠두,상승료9.37배,병현저고우취식Bt면(P＜0.01).유차가견,AlSP3기인시록맹춘성충취식상규면후적중요소화매기인,병대자성충괄응취식Bt면구유중요작용.
