中华外科杂志
中華外科雜誌
중화외과잡지
CHINESE JOURNAL OF SURGERY
2005年
4期
247-251
,共5页
肖德常%邓廉夫%杨庆铭%张伟%吕学敏%冯伟
肖德常%鄧廉伕%楊慶銘%張偉%呂學敏%馮偉
초덕상%산렴부%양경명%장위%려학민%풍위
成纤维细胞%成骨细胞%转染%骨生成
成纖維細胞%成骨細胞%轉染%骨生成
성섬유세포%성골세포%전염%골생성
目的探讨外源性小鼠核结合因子a1(Cbfa1)/成骨细胞特异性转录因子2(Osf2)基因在兔皮肤成纤维细胞中的瞬时表达对该细胞成骨表型表达的作用.方法在阳离子脂质体介导下,将含外源性小鼠Cbfa1/Osf2基因的真核表达载体pSG5-Cbfa1/Osf2导入新西兰兔皮肤成纤维细胞.用RT-PCR方法检测Cbfa1、骨钙素、碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原前肽基因表达,以Western-Blot方法检测Cbfa1蛋白表达,以对硝基苯二磷酸底物法及放射免疫方法分别检测碱性磷酸酶活性及骨钙素分泌情况,并通过茜素红染色及扫描电子显微镜检测转染细胞形成骨性结节的能力.结果转染pSG5-Cbfa1/Osf2真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞内可见Cbfa1mRNA及Cbfa1蛋白瞬时表达,骨钙素mRNA、碱性磷酸酶mRNA及Ⅰ型胶原前肽mRNA大量表达,碱性磷酸酶活性增强,骨钙素大量分泌,细胞表面形成骨性结节.结论转染pSG5-Cbfa1/Osf2真核表达质粒的兔皮肤成纤维细胞能表达成骨相关基因及蛋白质,并在其表面形成骨性结节.
目的探討外源性小鼠覈結閤因子a1(Cbfa1)/成骨細胞特異性轉錄因子2(Osf2)基因在兔皮膚成纖維細胞中的瞬時錶達對該細胞成骨錶型錶達的作用.方法在暘離子脂質體介導下,將含外源性小鼠Cbfa1/Osf2基因的真覈錶達載體pSG5-Cbfa1/Osf2導入新西蘭兔皮膚成纖維細胞.用RT-PCR方法檢測Cbfa1、骨鈣素、堿性燐痠酶及Ⅰ型膠原前肽基因錶達,以Western-Blot方法檢測Cbfa1蛋白錶達,以對硝基苯二燐痠底物法及放射免疫方法分彆檢測堿性燐痠酶活性及骨鈣素分泌情況,併通過茜素紅染色及掃描電子顯微鏡檢測轉染細胞形成骨性結節的能力.結果轉染pSG5-Cbfa1/Osf2真覈錶達質粒的兔皮膚成纖維細胞內可見Cbfa1mRNA及Cbfa1蛋白瞬時錶達,骨鈣素mRNA、堿性燐痠酶mRNA及Ⅰ型膠原前肽mRNA大量錶達,堿性燐痠酶活性增彊,骨鈣素大量分泌,細胞錶麵形成骨性結節.結論轉染pSG5-Cbfa1/Osf2真覈錶達質粒的兔皮膚成纖維細胞能錶達成骨相關基因及蛋白質,併在其錶麵形成骨性結節.
목적탐토외원성소서핵결합인자a1(Cbfa1)/성골세포특이성전록인자2(Osf2)기인재토피부성섬유세포중적순시표체대해세포성골표형표체적작용.방법재양리자지질체개도하,장함외원성소서Cbfa1/Osf2기인적진핵표체재체pSG5-Cbfa1/Osf2도입신서란토피부성섬유세포.용RT-PCR방법검측Cbfa1、골개소、감성린산매급Ⅰ형효원전태기인표체,이Western-Blot방법검측Cbfa1단백표체,이대초기분이린산저물법급방사면역방법분별검측감성린산매활성급골개소분비정황,병통과천소홍염색급소묘전자현미경검측전염세포형성골성결절적능력.결과전염pSG5-Cbfa1/Osf2진핵표체질립적토피부성섬유세포내가견Cbfa1mRNA급Cbfa1단백순시표체,골개소mRNA、감성린산매mRNA급Ⅰ형효원전태mRNA대량표체,감성린산매활성증강,골개소대량분비,세포표면형성골성결절.결론전염pSG5-Cbfa1/Osf2진핵표체질립적토피부성섬유세포능표체성골상관기인급단백질,병재기표면형성골성결절.
