中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2006年
7期
1282-1288
,共7页
唐朝克%代小艳%杨峻浩%欧翔%任重%易光辉%王佐%刘录山%王双
唐朝剋%代小豔%楊峻浩%歐翔%任重%易光輝%王佐%劉錄山%王雙
당조극%대소염%양준호%구상%임중%역광휘%왕좌%류록산%왕쌍
ATP结合匣式转运子%载脂蛋白A类%流式细胞术%胆固醇%脂蛋白类%泡沫细胞
ATP結閤匣式轉運子%載脂蛋白A類%流式細胞術%膽固醇%脂蛋白類%泡沫細胞
ATP결합갑식전운자%재지단백A류%류식세포술%담고순%지단백류%포말세포
目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,观察载脂蛋白A-Ⅰ对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的影响,从而探讨载脂蛋白A-Ⅰ对动脉粥样硬化(As)发生发展的影响.方法:用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,高效液相色谱分析细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,运用逆转录-多聚酶链反应和Western印迹分别检测ABCA1 mRNA与ABCA1蛋白的表达,用流式细胞术检测细胞平均ABCA1荧光强度.结果:载脂蛋白A-Ⅰ引起THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞总胆固醇、游离胆固醇与胆固醇酯呈时间依赖性减少,而ABCA1蛋白质水平、细胞平均ABCA1荧光强度以及细胞内胆固醇流出呈时间依赖性增加,但ABCA1 mRNA没有明显变化.巯基蛋白酶抑制剂(leupeptin和ALLN)增加ABCA1蛋白质水平,而其它蛋白酶抑制剂(pepstatin A、aprotinin及phosphoramiddon)不增加ABCA1蛋白质水平,蛋白体抑制剂(lactacytin)和溶酶体抑制剂(NH4Cl)也不影响ABCA1蛋白质水平.结论:巯基蛋白酶可降解THp-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1蛋白质,而载脂蛋白A-Ⅰ可阻碍巯基蛋白酶降解ABCA1蛋白质,从而提高THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1蛋白质水平,增加细胞内胆固醇流出,降低细胞内胆固醇聚积.
目的:以THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞為研究對象,觀察載脂蛋白A-Ⅰ對THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞膽固醇流齣和三燐痠腺苷結閤盒轉運體A1(ABCA1)的影響,從而探討載脂蛋白A-Ⅰ對動脈粥樣硬化(As)髮生髮展的影響.方法:用液體閃爍計數器檢測細胞內膽固醇流齣,高效液相色譜分析細胞內總膽固醇、遊離膽固醇和膽固醇酯含量,運用逆轉錄-多聚酶鏈反應和Western印跡分彆檢測ABCA1 mRNA與ABCA1蛋白的錶達,用流式細胞術檢測細胞平均ABCA1熒光彊度.結果:載脂蛋白A-Ⅰ引起THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞總膽固醇、遊離膽固醇與膽固醇酯呈時間依賴性減少,而ABCA1蛋白質水平、細胞平均ABCA1熒光彊度以及細胞內膽固醇流齣呈時間依賴性增加,但ABCA1 mRNA沒有明顯變化.巰基蛋白酶抑製劑(leupeptin和ALLN)增加ABCA1蛋白質水平,而其它蛋白酶抑製劑(pepstatin A、aprotinin及phosphoramiddon)不增加ABCA1蛋白質水平,蛋白體抑製劑(lactacytin)和溶酶體抑製劑(NH4Cl)也不影響ABCA1蛋白質水平.結論:巰基蛋白酶可降解THp-1巨噬細胞源性泡沫細胞ABCA1蛋白質,而載脂蛋白A-Ⅰ可阻礙巰基蛋白酶降解ABCA1蛋白質,從而提高THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞ABCA1蛋白質水平,增加細胞內膽固醇流齣,降低細胞內膽固醇聚積.
목적:이THP-1거서세포원성포말세포위연구대상,관찰재지단백A-Ⅰ대THP-1거서세포원성포말세포담고순류출화삼린산선감결합합전운체A1(ABCA1)적영향,종이탐토재지단백A-Ⅰ대동맥죽양경화(As)발생발전적영향.방법:용액체섬삭계수기검측세포내담고순류출,고효액상색보분석세포내총담고순、유리담고순화담고순지함량,운용역전록-다취매련반응화Western인적분별검측ABCA1 mRNA여ABCA1단백적표체,용류식세포술검측세포평균ABCA1형광강도.결과:재지단백A-Ⅰ인기THP-1거서세포원성포말세포총담고순、유리담고순여담고순지정시간의뢰성감소,이ABCA1단백질수평、세포평균ABCA1형광강도이급세포내담고순류출정시간의뢰성증가,단ABCA1 mRNA몰유명현변화.구기단백매억제제(leupeptin화ALLN)증가ABCA1단백질수평,이기타단백매억제제(pepstatin A、aprotinin급phosphoramiddon)불증가ABCA1단백질수평,단백체억제제(lactacytin)화용매체억제제(NH4Cl)야불영향ABCA1단백질수평.결론:구기단백매가강해THp-1거서세포원성포말세포ABCA1단백질,이재지단백A-Ⅰ가조애구기단백매강해ABCA1단백질,종이제고THP-1거서세포원성포말세포ABCA1단백질수평,증가세포내담고순류출,강저세포내담고순취적.
