生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
51-60
,共10页
荞麦%Na+/H+反向转运蛋白%耐盐性%芦丁%高效液相色谱
蕎麥%Na+/H+反嚮轉運蛋白%耐鹽性%蘆丁%高效液相色譜
교맥%Na+/H+반향전운단백%내염성%호정%고효액상색보
通过农杆菌介导法将拟南芥液泡膜Na+/H+反向转运蛋白基因AtNHX1转入荞麦中,在2.0mg/L 6-BA、0.1mg/L IAA、1mg/L KT、50mg/L卡那霉素和500mg/L头孢霉素的MS培养基上进行选择培养,从来源于864块外植体的36块抗性愈伤组织中共获得426棵再生植株(转化频率为4.17%).经PCR、Southern印迹分析、RT-PCR和Northern检测,初步证实AtNHX1基因已整合至荞麦基因组中.用200mmol/L的盐水对转基因植株和对照植株进行胁迫处理6周,转基因植株能够生存,而对照植株死亡.用不同浓度的NaCl溶液处理转基因植株和对照植株,发现Na+及脯氨酸含量在转基因植株中的积累水平显著高于对照植株,而K+的含量在转基因植株中的积累水平低于对照植株.次生代谢产物黄酮类化合物芦丁在转基因植株根、茎和叶片中的含量也比对照植株明显要高.这些结果表明利用基因工程手段提高作物的耐盐性是可行的.
通過農桿菌介導法將擬南芥液泡膜Na+/H+反嚮轉運蛋白基因AtNHX1轉入蕎麥中,在2.0mg/L 6-BA、0.1mg/L IAA、1mg/L KT、50mg/L卡那黴素和500mg/L頭孢黴素的MS培養基上進行選擇培養,從來源于864塊外植體的36塊抗性愈傷組織中共穫得426棵再生植株(轉化頻率為4.17%).經PCR、Southern印跡分析、RT-PCR和Northern檢測,初步證實AtNHX1基因已整閤至蕎麥基因組中.用200mmol/L的鹽水對轉基因植株和對照植株進行脅迫處理6週,轉基因植株能夠生存,而對照植株死亡.用不同濃度的NaCl溶液處理轉基因植株和對照植株,髮現Na+及脯氨痠含量在轉基因植株中的積纍水平顯著高于對照植株,而K+的含量在轉基因植株中的積纍水平低于對照植株.次生代謝產物黃酮類化閤物蘆丁在轉基因植株根、莖和葉片中的含量也比對照植株明顯要高.這些結果錶明利用基因工程手段提高作物的耐鹽性是可行的.
통과농간균개도법장의남개액포막Na+/H+반향전운단백기인AtNHX1전입교맥중,재2.0mg/L 6-BA、0.1mg/L IAA、1mg/L KT、50mg/L잡나매소화500mg/L두포매소적MS배양기상진행선택배양,종래원우864괴외식체적36괴항성유상조직중공획득426과재생식주(전화빈솔위4.17%).경PCR、Southern인적분석、RT-PCR화Northern검측,초보증실AtNHX1기인이정합지교맥기인조중.용200mmol/L적염수대전기인식주화대조식주진행협박처리6주,전기인식주능구생존,이대조식주사망.용불동농도적NaCl용액처리전기인식주화대조식주,발현Na+급포안산함량재전기인식주중적적루수평현저고우대조식주,이K+적함량재전기인식주중적적루수평저우대조식주.차생대사산물황동류화합물호정재전기인식주근、경화협편중적함량야비대조식주명현요고.저사결과표명이용기인공정수단제고작물적내염성시가행적.
