中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
4期
386-389
,共4页
雷黎%赵志荣%朱绍春%刘森%卞茂红%张林杰%沈际佳
雷黎%趙誌榮%硃紹春%劉森%卞茂紅%張林傑%瀋際佳
뢰려%조지영%주소춘%류삼%변무홍%장림걸%침제가
日本血吸虫%人源性%噬菌体抗体库%Fab段抗体
日本血吸蟲%人源性%噬菌體抗體庫%Fab段抗體
일본혈흡충%인원성%서균체항체고%Fab단항체
目的 利用噬菌体抗体展示技术构建人源性抗日本血吸虫Fab段噬菌体抗体库并进行初步鉴定.方法 RTPCR从对血吸虫感染有一定抗性成年人外周血淋巴细胞中扩增出人IgG轻链和重链Fd段基因片段,将其克隆入PComb3中,构建人源性Fab段噬菌体抗体库,并用限制性内切酶酶切、序列分析、DOT-BLOT以及SDS-PAGE等方法对噬菌体抗体库进行初步鉴定.结果 噬菌体抗体库的滴度为6.2×1011/L,库容量为1.2×107,酶切鉴定结果显示噬菌体抗体库轻重链重组率达到66.6%,测序结果表明克隆入PComb3的是人免疫球蛋白轻链和重链基因,DOT-BLOT实验证明该抗体库表达了人源性的抗体,而SDS-PAGE证实了免疫球蛋白Fab段的可溶性表达.结论 成功地构建了人源性抗日本血吸虫Fab段噬菌体抗体库,为筛选人源性抗日本血吸虫的抗体、研究这些抗体的特性和功能奠定了基础.
目的 利用噬菌體抗體展示技術構建人源性抗日本血吸蟲Fab段噬菌體抗體庫併進行初步鑒定.方法 RTPCR從對血吸蟲感染有一定抗性成年人外週血淋巴細胞中擴增齣人IgG輕鏈和重鏈Fd段基因片段,將其剋隆入PComb3中,構建人源性Fab段噬菌體抗體庫,併用限製性內切酶酶切、序列分析、DOT-BLOT以及SDS-PAGE等方法對噬菌體抗體庫進行初步鑒定.結果 噬菌體抗體庫的滴度為6.2×1011/L,庫容量為1.2×107,酶切鑒定結果顯示噬菌體抗體庫輕重鏈重組率達到66.6%,測序結果錶明剋隆入PComb3的是人免疫毬蛋白輕鏈和重鏈基因,DOT-BLOT實驗證明該抗體庫錶達瞭人源性的抗體,而SDS-PAGE證實瞭免疫毬蛋白Fab段的可溶性錶達.結論 成功地構建瞭人源性抗日本血吸蟲Fab段噬菌體抗體庫,為篩選人源性抗日本血吸蟲的抗體、研究這些抗體的特性和功能奠定瞭基礎.
목적 이용서균체항체전시기술구건인원성항일본혈흡충Fab단서균체항체고병진행초보감정.방법 RTPCR종대혈흡충감염유일정항성성년인외주혈림파세포중확증출인IgG경련화중련Fd단기인편단,장기극륭입PComb3중,구건인원성Fab단서균체항체고,병용한제성내절매매절、서렬분석、DOT-BLOT이급SDS-PAGE등방법대서균체항체고진행초보감정.결과 서균체항체고적적도위6.2×1011/L,고용량위1.2×107,매절감정결과현시서균체항체고경중련중조솔체도66.6%,측서결과표명극륭입PComb3적시인면역구단백경련화중련기인,DOT-BLOT실험증명해항체고표체료인원성적항체,이SDS-PAGE증실료면역구단백Fab단적가용성표체.결론 성공지구건료인원성항일본혈흡충Fab단서균체항체고,위사선인원성항일본혈흡충적항체、연구저사항체적특성화공능전정료기출.
