中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
3期
227-230
,共4页
陈越%高畅%陈勇%佟立全%孔维%金英花
陳越%高暢%陳勇%佟立全%孔維%金英花
진월%고창%진용%동립전%공유%금영화
促凋亡蛋白%多克隆抗体%特异性
促凋亡蛋白%多剋隆抗體%特異性
촉조망단백%다극륭항체%특이성
目的 制备抗BID的多克隆抗体,用于检测凋亡信号转导过程中BID蛋白的表达.方法 采用PCR技术合成编码BID特异性肽段的基因,构建GST融合基因表达载体,在E.coli BL21中诱导表达GST-BID多肽的融合蛋白,经Glutathione Sepharose)4B纯化后免疫家兔,免疫血清经纯化后,得到抗BID的多克隆抗体,经Western blot鉴定其特异性.结果 通过PCR扩增获得了BID肽段的编码基因;pGEX-6P-1-BID多肽重组质粒经酶切鉴定及测序证明构建正确;在E.coliBL21中表达了CST-BID多肽融合蛋白;纯化后蛋白纯度达95%;制备的抗BID多克隆抗体能够特异地识别BID蛋白.结论 所制备的抗BID多克隆抗体可特异性检测BID蛋白.
目的 製備抗BID的多剋隆抗體,用于檢測凋亡信號轉導過程中BID蛋白的錶達.方法 採用PCR技術閤成編碼BID特異性肽段的基因,構建GST融閤基因錶達載體,在E.coli BL21中誘導錶達GST-BID多肽的融閤蛋白,經Glutathione Sepharose)4B純化後免疫傢兔,免疫血清經純化後,得到抗BID的多剋隆抗體,經Western blot鑒定其特異性.結果 通過PCR擴增穫得瞭BID肽段的編碼基因;pGEX-6P-1-BID多肽重組質粒經酶切鑒定及測序證明構建正確;在E.coliBL21中錶達瞭CST-BID多肽融閤蛋白;純化後蛋白純度達95%;製備的抗BID多剋隆抗體能夠特異地識彆BID蛋白.結論 所製備的抗BID多剋隆抗體可特異性檢測BID蛋白.
목적 제비항BID적다극륭항체,용우검측조망신호전도과정중BID단백적표체.방법 채용PCR기술합성편마BID특이성태단적기인,구건GST융합기인표체재체,재E.coli BL21중유도표체GST-BID다태적융합단백,경Glutathione Sepharose)4B순화후면역가토,면역혈청경순화후,득도항BID적다극륭항체,경Western blot감정기특이성.결과 통과PCR확증획득료BID태단적편마기인;pGEX-6P-1-BID다태중조질립경매절감정급측서증명구건정학;재E.coliBL21중표체료CST-BID다태융합단백;순화후단백순도체95%;제비적항BID다극륭항체능구특이지식별BID단백.결론 소제비적항BID다극륭항체가특이성검측BID단백.
