中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2009年
6期
1077-1080
,共4页
CD34+干细胞%血管内皮生长因子%免疫荧光%流式细胞术
CD34+榦細胞%血管內皮生長因子%免疫熒光%流式細胞術
CD34+간세포%혈관내피생장인자%면역형광%류식세포술
背景:有研究证实,骨髓中CD34+干细胞在一定条件下具有向内皮细胞分化的潜能.目的:体外分离、纯化、培养和扩增人CD34+造血干细胞,并检测其免疫学表型,观察血管内皮生长因子对其体外诱导分化后细胞免疫表型的变化.设计、时间及地点:细胞学观察实验,于2005-10/2007-10在南方医科大学神经生物学教研室完成.材料:骨髓来源于健康供者.方法:利用Percoll梯度分离、贴壁筛选法及单克隆培养法分离培养、扩增人骨髓CD34+干细胞.采用脂质体介导转染法,选生长良好的传代细胞,以血管内皮生长因子165基因转染人骨髓CD34+干细胞.主要观察指标:采用免疫荧光和流式细胞术检测人骨髓CD34+干细胞免疫学表型.经血管内皮生长因子165基因转染后,人骨髓CD34+干细胞的表型变化以及血管内皮生长因子的分泌情况.结果:体外分离培养出高度同源性的人骨髓CD34+干细胞,细胞形态呈成纤维细胞样.CD44、CD29和c-kit阳性,CD31和CD54阴性;经血管内皮生长因子165诱导后,人骨髓CD34+干细胞表面标志CD44表达降低,CD31升高,呈现典型的内皮细胞表型,并且获得大量分泌血管内皮生长因子的能力.结论:采用Percoll分离液梯度离心继以贴壁筛选法及单克隆培养法联合筛选分离,可培养扩增}H高度同源的CD34+干细胞,经血管内皮生长因子基因转染后,CD34+干细胞呈典型的内皮细胞表型,验证了其具有向内皮细胞分化的潜能.
揹景:有研究證實,骨髓中CD34+榦細胞在一定條件下具有嚮內皮細胞分化的潛能.目的:體外分離、純化、培養和擴增人CD34+造血榦細胞,併檢測其免疫學錶型,觀察血管內皮生長因子對其體外誘導分化後細胞免疫錶型的變化.設計、時間及地點:細胞學觀察實驗,于2005-10/2007-10在南方醫科大學神經生物學教研室完成.材料:骨髓來源于健康供者.方法:利用Percoll梯度分離、貼壁篩選法及單剋隆培養法分離培養、擴增人骨髓CD34+榦細胞.採用脂質體介導轉染法,選生長良好的傳代細胞,以血管內皮生長因子165基因轉染人骨髓CD34+榦細胞.主要觀察指標:採用免疫熒光和流式細胞術檢測人骨髓CD34+榦細胞免疫學錶型.經血管內皮生長因子165基因轉染後,人骨髓CD34+榦細胞的錶型變化以及血管內皮生長因子的分泌情況.結果:體外分離培養齣高度同源性的人骨髓CD34+榦細胞,細胞形態呈成纖維細胞樣.CD44、CD29和c-kit暘性,CD31和CD54陰性;經血管內皮生長因子165誘導後,人骨髓CD34+榦細胞錶麵標誌CD44錶達降低,CD31升高,呈現典型的內皮細胞錶型,併且穫得大量分泌血管內皮生長因子的能力.結論:採用Percoll分離液梯度離心繼以貼壁篩選法及單剋隆培養法聯閤篩選分離,可培養擴增}H高度同源的CD34+榦細胞,經血管內皮生長因子基因轉染後,CD34+榦細胞呈典型的內皮細胞錶型,驗證瞭其具有嚮內皮細胞分化的潛能.
배경:유연구증실,골수중CD34+간세포재일정조건하구유향내피세포분화적잠능.목적:체외분리、순화、배양화확증인CD34+조혈간세포,병검측기면역학표형,관찰혈관내피생장인자대기체외유도분화후세포면역표형적변화.설계、시간급지점:세포학관찰실험,우2005-10/2007-10재남방의과대학신경생물학교연실완성.재료:골수래원우건강공자.방법:이용Percoll제도분리、첩벽사선법급단극륭배양법분리배양、확증인골수CD34+간세포.채용지질체개도전염법,선생장량호적전대세포,이혈관내피생장인자165기인전염인골수CD34+간세포.주요관찰지표:채용면역형광화류식세포술검측인골수CD34+간세포면역학표형.경혈관내피생장인자165기인전염후,인골수CD34+간세포적표형변화이급혈관내피생장인자적분비정황.결과:체외분리배양출고도동원성적인골수CD34+간세포,세포형태정성섬유세포양.CD44、CD29화c-kit양성,CD31화CD54음성;경혈관내피생장인자165유도후,인골수CD34+간세포표면표지CD44표체강저,CD31승고,정현전형적내피세포표형,병차획득대량분비혈관내피생장인자적능력.결론:채용Percoll분리액제도리심계이첩벽사선법급단극륭배양법연합사선분리,가배양확증}H고도동원적CD34+간세포,경혈관내피생장인자기인전염후,CD34+간세포정전형적내피세포표형,험증료기구유향내피세포분화적잠능.
