湖南农业大学学报（自然科学版）
湖南農業大學學報（自然科學版）
호남농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HUNAN AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2010年
4期
449-452
,共4页
黎炯%叶星%卢迈新%邓国成%田园园%江小燕%黎坚平
黎炯%葉星%盧邁新%鄧國成%田園園%江小燕%黎堅平
려형%협성%로매신%산국성%전완완%강소연%려견평
双重PCR%无乳链球菌%海豚链球菌%cfb基因%16S rRNA
雙重PCR%無乳鏈毬菌%海豚鏈毬菌%cfb基因%16S rRNA
쌍중PCR%무유련구균%해돈련구균%cfb기인%16S rRNA
根据无乳链球菌的cfb基因和海豚链球菌16S rRNA基因序列,设计、合成2对引物,优化扩增条件,建立了快速鉴别无乳链球菌和海豚链球菌的双重PCR方法.用该方法扩增无乳链球菌和海豚链球菌,可分别获得474、296 bp的特异性片段,扩增嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌等其他常见鱼病原菌无特异性片段.该方法可实现对无乳链球菌和海豚链球菌的快速鉴别,具较高的灵敏度,可检测到基因组含量分别为3.2×10-3 ng/μL的无乳链球菌和3.0×10-2 ng/μL的海豚链球菌.对采集自广东与海南两省养殖罗非鱼病鱼的11份病原样品进行检测,均可获得474 bp片段,测序与BLAST分析结果表明,扩增到的序列均为无乳链球菌cfb基因序列,可从分子水平上确定这些样品为无乳链球菌,与生化鉴定结果一致.
根據無乳鏈毬菌的cfb基因和海豚鏈毬菌16S rRNA基因序列,設計、閤成2對引物,優化擴增條件,建立瞭快速鑒彆無乳鏈毬菌和海豚鏈毬菌的雙重PCR方法.用該方法擴增無乳鏈毬菌和海豚鏈毬菌,可分彆穫得474、296 bp的特異性片段,擴增嗜水氣單胞菌、銅綠假單胞菌等其他常見魚病原菌無特異性片段.該方法可實現對無乳鏈毬菌和海豚鏈毬菌的快速鑒彆,具較高的靈敏度,可檢測到基因組含量分彆為3.2×10-3 ng/μL的無乳鏈毬菌和3.0×10-2 ng/μL的海豚鏈毬菌.對採集自廣東與海南兩省養殖囉非魚病魚的11份病原樣品進行檢測,均可穫得474 bp片段,測序與BLAST分析結果錶明,擴增到的序列均為無乳鏈毬菌cfb基因序列,可從分子水平上確定這些樣品為無乳鏈毬菌,與生化鑒定結果一緻.
근거무유련구균적cfb기인화해돈련구균16S rRNA기인서렬,설계、합성2대인물,우화확증조건,건립료쾌속감별무유련구균화해돈련구균적쌍중PCR방법.용해방법확증무유련구균화해돈련구균,가분별획득474、296 bp적특이성편단,확증기수기단포균、동록가단포균등기타상견어병원균무특이성편단.해방법가실현대무유련구균화해돈련구균적쾌속감별,구교고적령민도,가검측도기인조함량분별위3.2×10-3 ng/μL적무유련구균화3.0×10-2 ng/μL적해돈련구균.대채집자엄동여해남량성양식라비어병어적11빈병원양품진행검측,균가획득474 bp편단,측서여BLAST분석결과표명,확증도적서렬균위무유련구균cfb기인서렬,가종분자수평상학정저사양품위무유련구균,여생화감정결과일치.
