中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2011年
13期
204-207
,共4页
马建华%杨艳君%郭生金%胡变芳
馬建華%楊豔君%郭生金%鬍變芳
마건화%양염군%곽생금%호변방
芹菜%RAPD%优化%反应体系
芹菜%RAPD%優化%反應體繫
근채%RAPD%우화%반응체계
本试验以一般RAPD反应程序为基础,采用单因素递进筛选方法,针对Taq DNA聚合酶、Mg2+、dNTPs、随机引物和DNA模板5个主要影响因素,分别设置5个不同浓度梯度,对芹菜进行RAPD-PCR扩增,建立了芹菜RAPD技术最优体系.结果表明:25 μL反应体系中含Taq DNA聚合酶1.0 U、Mg2+3.0 mM、dNTPs 0.2 mM、引物28 ng、模板DNA 70 ng,10×PCR Bufier 2.5μL;扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min,进行42个循环,最后72℃延伸10min.
本試驗以一般RAPD反應程序為基礎,採用單因素遞進篩選方法,針對Taq DNA聚閤酶、Mg2+、dNTPs、隨機引物和DNA模闆5箇主要影響因素,分彆設置5箇不同濃度梯度,對芹菜進行RAPD-PCR擴增,建立瞭芹菜RAPD技術最優體繫.結果錶明:25 μL反應體繫中含Taq DNA聚閤酶1.0 U、Mg2+3.0 mM、dNTPs 0.2 mM、引物28 ng、模闆DNA 70 ng,10×PCR Bufier 2.5μL;擴增程序為:94℃預變性5 min,94℃變性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min,進行42箇循環,最後72℃延伸10min.
본시험이일반RAPD반응정서위기출,채용단인소체진사선방법,침대Taq DNA취합매、Mg2+、dNTPs、수궤인물화DNA모판5개주요영향인소,분별설치5개불동농도제도,대근채진행RAPD-PCR확증,건립료근채RAPD기술최우체계.결과표명:25 μL반응체계중함Taq DNA취합매1.0 U、Mg2+3.0 mM、dNTPs 0.2 mM、인물28 ng、모판DNA 70 ng,10×PCR Bufier 2.5μL;확증정서위:94℃예변성5 min,94℃변성1 min,36℃퇴화1 min,72℃연신1 min,진행42개순배,최후72℃연신10min.
