广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
13期
1668-1671
,共4页
张宇%吴少鹏%夏雄智%许学猛%钟招明%陈建庭
張宇%吳少鵬%夏雄智%許學猛%鐘招明%陳建庭
장우%오소붕%하웅지%허학맹%종초명%진건정
人黄韧带细胞%体外培养%胶原酶消化加组织块法
人黃韌帶細胞%體外培養%膠原酶消化加組織塊法
인황인대세포%체외배양%효원매소화가조직괴법
目的 比较不同的人黄韧带细胞(LFCs)原代培养方法,优化培养条件,提高培养成功率.方法 采集成年腰椎间盘突出症患者后路椎间盘摘除术中的黄韧带,分别采用组织块法、酶消化法、胶原酶消化加组织块法体外原代培养LFCs,传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其吸光度(OD)值,评价细胞增殖状况,绘制细胞生长曲线;用免疫荧光染色法检测传3代细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原的表达.结果 胶原酶消化加组织块法中组织块解离、贴附和细胞游出状况均优于单纯组织块法或单纯酶消化法,成功率较高.原代培养细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原免疫荧光染色呈阳性.结论 胶原酶消化加组织块法可提高LFCs原代培养的成功率.
目的 比較不同的人黃韌帶細胞(LFCs)原代培養方法,優化培養條件,提高培養成功率.方法 採集成年腰椎間盤突齣癥患者後路椎間盤摘除術中的黃韌帶,分彆採用組織塊法、酶消化法、膠原酶消化加組織塊法體外原代培養LFCs,傳代培養;倒置相差顯微鏡下觀察細胞從組織塊內遷齣時間、細胞形態和生長狀態;四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)測定其吸光度(OD)值,評價細胞增殖狀況,繪製細胞生長麯線;用免疫熒光染色法檢測傳3代細胞的波形蛋白和Ⅰ型膠原的錶達.結果 膠原酶消化加組織塊法中組織塊解離、貼附和細胞遊齣狀況均優于單純組織塊法或單純酶消化法,成功率較高.原代培養細胞的波形蛋白和Ⅰ型膠原免疫熒光染色呈暘性.結論 膠原酶消化加組織塊法可提高LFCs原代培養的成功率.
목적 비교불동적인황인대세포(LFCs)원대배양방법,우화배양조건,제고배양성공솔.방법 채집성년요추간반돌출증환자후로추간반적제술중적황인대,분별채용조직괴법、매소화법、효원매소화가조직괴법체외원대배양LFCs,전대배양;도치상차현미경하관찰세포종조직괴내천출시간、세포형태화생장상태;사갑기우담서염비색법(MTT)측정기흡광도(OD)치,평개세포증식상황,회제세포생장곡선;용면역형광염색법검측전3대세포적파형단백화Ⅰ형효원적표체.결과 효원매소화가조직괴법중조직괴해리、첩부화세포유출상황균우우단순조직괴법혹단순매소화법,성공솔교고.원대배양세포적파형단백화Ⅰ형효원면역형광염색정양성.결론 효원매소화가조직괴법가제고LFCs원대배양적성공솔.
