中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2012年
2期
219-223
,共5页
中药含药血清%内皮细胞%Toll样受体4%髓样分化因子88%血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1%动脉粥样硬化
中藥含藥血清%內皮細胞%Toll樣受體4%髓樣分化因子88%血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1%動脈粥樣硬化
중약함약혈청%내피세포%Toll양수체4%수양분화인자88%혈응소양양화저밀도지단백수체-1%동맥죽양경화
目的 研究益气活血复方含药血清对脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号转导通路及下游炎症因子血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1( LOX-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响,从基因和蛋白水平研究益气活血复方防治动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机制.方法 含药血清的制备:选择新西兰大耳白兔20只,随机分为4组,即空白对照组、中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组,每组5只.正常组以生理盐水灌胃;中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组分别以高、中、低浓度益气活血复方灌胃,连续灌胃7天.在末次灌胃给药2h后,心脏取血,离心后分离血清.体外培养HUVECs,随机分为6组,即空白对照组、模型组、西药对照组、中药高、中、低浓度组,用LPS刺激2h后,分别加入高、中、低浓度益气活血复方含药血清干预,24h后收集细胞,用荧光定量PCR方法测定TLR4、骨髓样分化因子88( MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、Toll样受体相关分子(TRAM)、Toll样受体相关的干扰素活化因子(TRIF)、核转录因子-κB (NF-κB)、LOX-1、NF-α及ICAM-1的基因表达,用Western blot法分别测定TLR4、MyD88、TRAF-6、LOX-1的蛋白表达.结果 用LPS刺激HUVECs后,引起TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM、TRIF、NF-κB、LOX-1、TNF-α及ICAM-1的高表达,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),而用益气活血复方含药血清干预以后显著抑制TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB、LOX-1、TNF-α及ICAM-1的高表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);对TRAM和TRIF无抑制作用.结论 益气活血复方可抑制TLR4信号转导通路及LOX-1、TNF-α及ICAM-1的表达,这可能是其治疗各种免疫炎症性疾病及防治动脉粥样硬化作用的机制之一.
目的 研究益氣活血複方含藥血清對脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)誘導的人臍靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) Toll樣受體4(Toll-like receptor 4,TLR4)信號轉導通路及下遊炎癥因子血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1( LOX-1)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、細胞間黏附分子-1(ICAM-1)的影響,從基因和蛋白水平研究益氣活血複方防治動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)的機製.方法 含藥血清的製備:選擇新西蘭大耳白兔20隻,隨機分為4組,即空白對照組、中藥高濃度組、中藥中濃度組、中藥低濃度組,每組5隻.正常組以生理鹽水灌胃;中藥高濃度組、中藥中濃度組、中藥低濃度組分彆以高、中、低濃度益氣活血複方灌胃,連續灌胃7天.在末次灌胃給藥2h後,心髒取血,離心後分離血清.體外培養HUVECs,隨機分為6組,即空白對照組、模型組、西藥對照組、中藥高、中、低濃度組,用LPS刺激2h後,分彆加入高、中、低濃度益氣活血複方含藥血清榦預,24h後收集細胞,用熒光定量PCR方法測定TLR4、骨髓樣分化因子88( MyD88)、腫瘤壞死因子受體相關因子-6(TRAF-6)、Toll樣受體相關分子(TRAM)、Toll樣受體相關的榦擾素活化因子(TRIF)、覈轉錄因子-κB (NF-κB)、LOX-1、NF-α及ICAM-1的基因錶達,用Western blot法分彆測定TLR4、MyD88、TRAF-6、LOX-1的蛋白錶達.結果 用LPS刺激HUVECs後,引起TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM、TRIF、NF-κB、LOX-1、TNF-α及ICAM-1的高錶達,與空白對照組比較,差異有統計學意義(P<0.01),而用益氣活血複方含藥血清榦預以後顯著抑製TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB、LOX-1、TNF-α及ICAM-1的高錶達,與模型組比較,差異有統計學意義(P<0.05);對TRAM和TRIF無抑製作用.結論 益氣活血複方可抑製TLR4信號轉導通路及LOX-1、TNF-α及ICAM-1的錶達,這可能是其治療各種免疫炎癥性疾病及防治動脈粥樣硬化作用的機製之一.
목적 연구익기활혈복방함약혈청대지다당( lipopolysaccharide,LPS)유도적인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs) Toll양수체4(Toll-like receptor 4,TLR4)신호전도통로급하유염증인자혈응소양양화저밀도지단백수체-1( LOX-1)、종류배사인자(TNF-α)、세포간점부분자-1(ICAM-1)적영향,종기인화단백수평연구익기활혈복방방치동맥죽양경화(atherosclerosis,AS)적궤제.방법 함약혈청적제비:선택신서란대이백토20지,수궤분위4조,즉공백대조조、중약고농도조、중약중농도조、중약저농도조,매조5지.정상조이생리염수관위;중약고농도조、중약중농도조、중약저농도조분별이고、중、저농도익기활혈복방관위,련속관위7천.재말차관위급약2h후,심장취혈,리심후분리혈청.체외배양HUVECs,수궤분위6조,즉공백대조조、모형조、서약대조조、중약고、중、저농도조,용LPS자격2h후,분별가입고、중、저농도익기활혈복방함약혈청간예,24h후수집세포,용형광정량PCR방법측정TLR4、골수양분화인자88( MyD88)、종류배사인자수체상관인자-6(TRAF-6)、Toll양수체상관분자(TRAM)、Toll양수체상관적간우소활화인자(TRIF)、핵전록인자-κB (NF-κB)、LOX-1、NF-α급ICAM-1적기인표체,용Western blot법분별측정TLR4、MyD88、TRAF-6、LOX-1적단백표체.결과 용LPS자격HUVECs후,인기TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM、TRIF、NF-κB、LOX-1、TNF-α급ICAM-1적고표체,여공백대조조비교,차이유통계학의의(P<0.01),이용익기활혈복방함약혈청간예이후현저억제TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB、LOX-1、TNF-α급ICAM-1적고표체,여모형조비교,차이유통계학의의(P<0.05);대TRAM화TRIF무억제작용.결론 익기활혈복방가억제TLR4신호전도통로급LOX-1、TNF-α급ICAM-1적표체,저가능시기치료각충면역염증성질병급방치동맥죽양경화작용적궤제지일.