广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
10期
141-144
,共4页
乜玉丽%许厚强%赵佳福%张勇%陈祥
乜玉麗%許厚彊%趙佳福%張勇%陳祥
먀옥려%허후강%조가복%장용%진상
贵州白香猪%Gadd45基因%pMD19-T载体%克隆%序列分析
貴州白香豬%Gadd45基因%pMD19-T載體%剋隆%序列分析
귀주백향저%Gadd45기인%pMD19-T재체%극륭%서렬분석
采用试剂盒提取RNA和RT-PCR法获得贵州白香猪Gadd45G基因cDNA序列,构建了贵州白香猪Gadd45G基因的pMD19亚克隆载体,并对该重组质粒进行测序分析,为贵州白香猪作为模式动物提供理论基础,为构建Gadd45G基因真核表达载体和转基因猪研究奠定基础.PCR、双酶切鉴定结果表明,已成功克隆的贵州白香猪Gadd45G基因的cDNA序列长度为480 bp.测序结果显示,贵州白香猪Gadd45G基因cDNA序列与普通猪、人类、家鼠、牛的同源性分别为99.6％、89.6％、90.2％ 、91.2％,氨基酸同源性分别为98.8％、95.6％、95.0％ 、96.2％.序列分析表明,贵州白香猪Gadd45G基因编码序列与普通猪相比,有两处发生碱基突变,其中一处为错义突变(第385处的G→A突变)使氨基酸由丙氨酸突变成苏氨酸.
採用試劑盒提取RNA和RT-PCR法穫得貴州白香豬Gadd45G基因cDNA序列,構建瞭貴州白香豬Gadd45G基因的pMD19亞剋隆載體,併對該重組質粒進行測序分析,為貴州白香豬作為模式動物提供理論基礎,為構建Gadd45G基因真覈錶達載體和轉基因豬研究奠定基礎.PCR、雙酶切鑒定結果錶明,已成功剋隆的貴州白香豬Gadd45G基因的cDNA序列長度為480 bp.測序結果顯示,貴州白香豬Gadd45G基因cDNA序列與普通豬、人類、傢鼠、牛的同源性分彆為99.6％、89.6％、90.2％ 、91.2％,氨基痠同源性分彆為98.8％、95.6％、95.0％ 、96.2％.序列分析錶明,貴州白香豬Gadd45G基因編碼序列與普通豬相比,有兩處髮生堿基突變,其中一處為錯義突變(第385處的G→A突變)使氨基痠由丙氨痠突變成囌氨痠.
채용시제합제취RNA화RT-PCR법획득귀주백향저Gadd45G기인cDNA서렬,구건료귀주백향저Gadd45G기인적pMD19아극륭재체,병대해중조질립진행측서분석,위귀주백향저작위모식동물제공이론기출,위구건Gadd45G기인진핵표체재체화전기인저연구전정기출.PCR、쌍매절감정결과표명,이성공극륭적귀주백향저Gadd45G기인적cDNA서렬장도위480 bp.측서결과현시,귀주백향저Gadd45G기인cDNA서렬여보통저、인류、가서、우적동원성분별위99.6％、89.6％、90.2％ 、91.2％,안기산동원성분별위98.8％、95.6％、95.0％ 、96.2％.서렬분석표명,귀주백향저Gadd45G기인편마서렬여보통저상비,유량처발생감기돌변,기중일처위착의돌변(제385처적G→A돌변)사안기산유병안산돌변성소안산.
