CAJ | 학술논문

本文旨在研究定位转新基因(HCY-2)与神经管畸形发生的时间-效应关系及可能的作用机理.采用脂质体介导基因转移技术将已构建的含有全长HCY-2 cDNA的真核表达载体定位转入不同发育时期的鸡胚(Hamburger-Hamilton 1、6和12期),培养后再用RT-PCR、免疫组化、扫描和透射电镜及光镜等技术探讨HCY-2基因在4天龄鸡胚中的表达、分布和致畸作用.结果在3个不同时期定位导入HCY-2基因后,均可诱导胚胎发生神经管畸形,以1天龄头侧微注射的胚胎最为敏感,神经管畸形发生率高达35.3%,呈明显时间-效应关系,其表现型是:脑膨出、无脑、脊柱裂和小头.转基因组胚胎能够表达HCY-2 mRNA和相应编码蛋白,主要分布于胚胎脑组织中.扫描和透射电镜下发现HCY-2基因能损伤细胞表面和内部的超微结构;在畸形部位还观察到大量的凋亡细胞.结论是,HYC-2基因可能是一种新的基因毒性因子,它在胚胎早期神经管畸形发生机制中起重要作用.
본문지재연구정위전신기인(HCY-2)여신경관기형발생적시간-효응관계급가능적작용궤리.채용지질체개도기인전이기술장이구건적함유전장HCY-2 cDNA적진핵표체재체정위전입불동발육시기적계배(Hamburger-Hamilton 1、6화12기),배양후재용RT-PCR、면역조화、소묘화투사전경급광경등기술탐토HCY-2기인재4천령계배중적표체、분포화치기작용.결과재3개불동시기정위도입HCY-2기인후,균가유도배태발생신경관기형,이1천령두측미주사적배태최위민감,신경관기형발생솔고체35.3%,정명현시간-효응관계,기표현형시:뇌팽출、무뇌、척주렬화소두.전기인조배태능구표체HCY-2 mRNA화상응편마단백,주요분포우배태뇌조직중.소묘화투사전경하발현HCY-2기인능손상세포표면화내부적초미결구;재기형부위환관찰도대량적조망세포.결론시,HYC-2기인가능시일충신적기인독성인자,타재배태조기신경관기형발생궤제중기중요작용.