分泌性蛋白SPLUNC1对上呼吸道绿脓杆菌的抑制作用
분비성단백SPLUNC1대상호흡도록농간균적억제작용
Effect of growth inhibition of the secretory protein SPLUNC1 on Pseudomonas aeruginosa
  • 万方数据
    中南大学学报（医学版） 중남대학학보（의학판）
    JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
    2006年 4期 464-469 ,共6页

    周后德%武明花%石磊%周鸣%杨一新%赵瑾%邓坦%李小玲%沈守荣%李桂源

    주후덕%무명화%석뢰%주명%양일신%조근%산탄%리소령%침수영%리계원

    SPLUNC1%绿脓杆菌%脂多糖%杀菌/抑菌%固有免疫 SPLUNC1%綠膿桿菌%脂多糖%殺菌/抑菌%固有免疫
    SPLUNC1%록농간균%지다당%살균/억균%고유면역
    目的:构建哺乳动物细胞表达的SPLUNC1重组蛋白,通过体外实验验证其杀菌/抑菌功能,并进一步研究其机制是否与SPLUNC1蛋白结合细菌脂多糖有关,从而为其将来临床应用奠定基础.方法:将SPLUNC1克隆入pCMV-tag4A哺乳动物表达载体,稳定转染鼻咽癌HNE1细胞株;收集细胞培养上清液,用其处理从患者上呼吸道分离的绿脓杆菌,比较转染SPLUNC1基因的细胞培养上清与转染空白载体的细胞培养上清对细菌克隆形成率的影响.同时将脂多糖包被96孔板,与SPLUNC1蛋白共同孵育,ELISA法检测SPLUNC1是否与细菌脂多糖结合;利用FTTC标记的脂多糖干预转染SPLUNC1基因及空白载体的细胞,观察细胞内脂多糖与SPLUNC1的结合作用.结果:转染SPLUNC1基因的细胞培养上清能显著抑制绿脓杆菌在LB软琼脂板上形成集落;体外试验表明,SPLUNC1能与细菌脂多糖结合,但结合效率低;HNE1细胞经转染SPLUNC1后,细菌脂多糖摄取明显增加.结论:重组SPLUNC1蛋白能经转染细胞分泌到培养上清液中,具有结合细菌脂多糖,杀灭或抑制上呼吸道绿脓杆菌的功能,从而可能具有重要的临床应用价值.
    목적:구건포유동물세포표체적SPLUNC1중조단백,통과체외실험험증기살균/억균공능,병진일보연구기궤제시부여SPLUNC1단백결합세균지다당유관,종이위기장래림상응용전정기출.방법:장SPLUNC1극륭입pCMV-tag4A포유동물표체재체,은정전염비인암HNE1세포주;수집세포배양상청액,용기처리종환자상호흡도분리적록농간균,비교전염SPLUNC1기인적세포배양상청여전염공백재체적세포배양상청대세균극륭형성솔적영향.동시장지다당포피96공판,여SPLUNC1단백공동부육,ELISA법검측SPLUNC1시부여세균지다당결합;이용FTTC표기적지다당간예전염SPLUNC1기인급공백재체적세포,관찰세포내지다당여SPLUNC1적결합작용.결과:전염SPLUNC1기인적세포배양상청능현저억제록농간균재LB연경지판상형성집락;체외시험표명,SPLUNC1능여세균지다당결합,단결합효솔저;HNE1세포경전염SPLUNC1후,세균지다당섭취명현증가.결론:중조SPLUNC1단백능경전염세포분비도배양상청액중,구유결합세균지다당,살멸혹억제상호흡도록농간균적공능,종이가능구유중요적림상응용개치.
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