南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2007年
6期
900-902
,共3页
高伟生%罗荣城%马树东%吕成伟%尤长宣%杨小民
高偉生%囉榮城%馬樹東%呂成偉%尤長宣%楊小民
고위생%라영성%마수동%려성위%우장선%양소민
细胞转染%树突状细胞%MAGE-3%多肽
細胞轉染%樹突狀細胞%MAGE-3%多肽
세포전염%수돌상세포%MAGE-3%다태
目的 探讨一种新型转染试剂BioPORTER将黑色素瘤抗原肽(MAGE-3)转染至树突状细胞(DC)的转染效率和细胞毒性.方法 人工合成并荧光素标记MAGE-3抗原肽,利用BioPORTER作为载体,将MAGE-3多肽转染至人外周血单核细胞来源的DC.倒置荧光显微镜及流式细胞仪检测MAGE-3的转染效率,MTT法检测转染试剂对DC的毒性影响.结果 总转染效率平均为(14.57±2.56)%,总细胞存活率平均为(92.58±4.38)%.在反应体系溶液pH为7.5的情况下,当DC密度为5×105/ml,多肽与转染试剂的比例(V/W)为4∶1,两者形成的复合物与细胞孵育8 h获得了较高的转染效率,且转染试剂对细胞的毒性较低.结论 BioPORTER在一定条件下可以较高效率地将MAGE-3多肽转染至DC内,且对DC不产生明显的细胞毒性,为进一步研究以抗原肽为基础的DC疫苗提供了一种较为实用的方法.
目的 探討一種新型轉染試劑BioPORTER將黑色素瘤抗原肽(MAGE-3)轉染至樹突狀細胞(DC)的轉染效率和細胞毒性.方法 人工閤成併熒光素標記MAGE-3抗原肽,利用BioPORTER作為載體,將MAGE-3多肽轉染至人外週血單覈細胞來源的DC.倒置熒光顯微鏡及流式細胞儀檢測MAGE-3的轉染效率,MTT法檢測轉染試劑對DC的毒性影響.結果 總轉染效率平均為(14.57±2.56)%,總細胞存活率平均為(92.58±4.38)%.在反應體繫溶液pH為7.5的情況下,噹DC密度為5×105/ml,多肽與轉染試劑的比例(V/W)為4∶1,兩者形成的複閤物與細胞孵育8 h穫得瞭較高的轉染效率,且轉染試劑對細胞的毒性較低.結論 BioPORTER在一定條件下可以較高效率地將MAGE-3多肽轉染至DC內,且對DC不產生明顯的細胞毒性,為進一步研究以抗原肽為基礎的DC疫苗提供瞭一種較為實用的方法.
목적 탐토일충신형전염시제BioPORTER장흑색소류항원태(MAGE-3)전염지수돌상세포(DC)적전염효솔화세포독성.방법 인공합성병형광소표기MAGE-3항원태,이용BioPORTER작위재체,장MAGE-3다태전염지인외주혈단핵세포래원적DC.도치형광현미경급류식세포의검측MAGE-3적전염효솔,MTT법검측전염시제대DC적독성영향.결과 총전염효솔평균위(14.57±2.56)%,총세포존활솔평균위(92.58±4.38)%.재반응체계용액pH위7.5적정황하,당DC밀도위5×105/ml,다태여전염시제적비례(V/W)위4∶1,량자형성적복합물여세포부육8 h획득료교고적전염효솔,차전염시제대세포적독성교저.결론 BioPORTER재일정조건하가이교고효솔지장MAGE-3다태전염지DC내,차대DC불산생명현적세포독성,위진일보연구이항원태위기출적DC역묘제공료일충교위실용적방법.
