复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2009年
1期
14-18
,共5页
倪国华%范钰%陈坚%钱立平%林庚金%陈功星%丁佳逸%郑树
倪國華%範鈺%陳堅%錢立平%林庚金%陳功星%丁佳逸%鄭樹
예국화%범옥%진견%전립평%림경금%진공성%정가일%정수
大肠肿瘤%polo-like kinase-1%RNA干扰%小干扰RNA%端粒酶
大腸腫瘤%polo-like kinase-1%RNA榦擾%小榦擾RNA%耑粒酶
대장종류%polo-like kinase-1%RNA간우%소간우RNA%단립매
目的 探讨polo-like kinase-1(PLK1)基因对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响.方法 根据PLK1基因序列特点,设计并用化学方法合成小干扰核糖核酸分子(small interfering RNA,siRNA),转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用实时定量PCR和Western blot检测PLK1基因mRNA和蛋白表达水平.分别采用MTT法和TRAP-ELISA方法检测PLK1基因转染对大肠癌细胞增殖和端粒酶活性的影响.结果 所设计的5个siRNA均能明显抑制大肠癌SW480细胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好.以P4转染处理大肠癌细胞后,PLK1 mRNA水平和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性.MTT和TRAP-ELISA方法检测发现,P4siRNA转染组细胞增殖和端粒酶活性明显受到抑制,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05,P<0.05).结论 PLK1基因对大肠癌细胞增殖具有重要的调控作用;以PLK1 siRNA转染处理大肠癌细胞,可明显抑制大肠癌细胞的恶性增殖,其机制可能与抑制端粒酶活性有关.
目的 探討polo-like kinase-1(PLK1)基因對大腸癌細胞增殖和耑粒酶活性的影響.方法 根據PLK1基因序列特點,設計併用化學方法閤成小榦擾覈糖覈痠分子(small interfering RNA,siRNA),轉染人大腸癌SW480細胞後,分彆採用實時定量PCR和Western blot檢測PLK1基因mRNA和蛋白錶達水平.分彆採用MTT法和TRAP-ELISA方法檢測PLK1基因轉染對大腸癌細胞增殖和耑粒酶活性的影響.結果 所設計的5箇siRNA均能明顯抑製大腸癌SW480細胞PLK1 mRNA水平,以P4效果最好.以P4轉染處理大腸癌細胞後,PLK1 mRNA水平和蛋白水平明顯下調,且呈濃度和時間依賴性.MTT和TRAP-ELISA方法檢測髮現,P4siRNA轉染組細胞增殖和耑粒酶活性明顯受到抑製,且呈濃度和時間依賴性(P<0.05,P<0.05).結論 PLK1基因對大腸癌細胞增殖具有重要的調控作用;以PLK1 siRNA轉染處理大腸癌細胞,可明顯抑製大腸癌細胞的噁性增殖,其機製可能與抑製耑粒酶活性有關.
목적 탐토polo-like kinase-1(PLK1)기인대대장암세포증식화단립매활성적영향.방법 근거PLK1기인서렬특점,설계병용화학방법합성소간우핵당핵산분자(small interfering RNA,siRNA),전염인대장암SW480세포후,분별채용실시정량PCR화Western blot검측PLK1기인mRNA화단백표체수평.분별채용MTT법화TRAP-ELISA방법검측PLK1기인전염대대장암세포증식화단립매활성적영향.결과 소설계적5개siRNA균능명현억제대장암SW480세포PLK1 mRNA수평,이P4효과최호.이P4전염처리대장암세포후,PLK1 mRNA수평화단백수평명현하조,차정농도화시간의뢰성.MTT화TRAP-ELISA방법검측발현,P4siRNA전염조세포증식화단립매활성명현수도억제,차정농도화시간의뢰성(P<0.05,P<0.05).결론 PLK1기인대대장암세포증식구유중요적조공작용;이PLK1 siRNA전염처리대장암세포,가명현억제대장암세포적악성증식,기궤제가능여억제단립매활성유관.
