海洋学报(中文版)
海洋學報(中文版)
해양학보(중문판)
ACTA OCEANOLOGICA SINICA
2011年
1期
111-120
,共10页
曲朦%施晓峰%张之文%丁少雄
麯朦%施曉峰%張之文%丁少雄
곡몽%시효봉%장지문%정소웅
赤点石斑鱼%HSP60%克隆%组织表达特性
赤點石斑魚%HSP60%剋隆%組織錶達特性
적점석반어%HSP60%극륭%조직표체특성
HSP60(heat shock protein 60,热休克蛋白60)作为高度保守的热休克蛋白家族的一员,不仅可以在应激状态下帮助其他蛋白正确折叠并恢复天然构象,还可作为危险信号作用于天然免疫系统.基于HSP60的EST序列设计特异引物,采用RACE技术成功克隆获得赤点石斑鱼HSP60 cDNA全序列及基因组全序列.其cDNA序列全长2 351 bp,包括75 bp的5'UTR,539 bp的3'UTR和1 737 bp的开放阅读框,共编码578个氨基酸.核苷酸及氨基酸序列比对结果显示该基因与其他脊椎动物的相似性很高.基于氨基酸序列构建的系统进化树与传统物种树基本吻合,说明HSP60可能是1个潜在的可用于物种系统进化研究的良好标记.所获得的赤点石斑鱼HSP60基因组全序列含有8个内含子和9个外显子,也与已知其他硬骨鱼类基本一致.这种在序列特征、蛋白空间结构及基因组结构上的高度保守性意味着HSP60在动物生命活动中可能发挥着至关重要的作用.通过实时PCR检测结果发现HSP60在赤点石斑鱼各组织中均有表达,而攻毒后鱼体肝的表达量显著增高(P<0.05),鳃、脾、胃和脑等重要组织器官的表达量也有不同程度的提高,该结果证实了HSP60基因在鱼类非特异性免疫应答中发挥了作用.
HSP60(heat shock protein 60,熱休剋蛋白60)作為高度保守的熱休剋蛋白傢族的一員,不僅可以在應激狀態下幫助其他蛋白正確摺疊併恢複天然構象,還可作為危險信號作用于天然免疫繫統.基于HSP60的EST序列設計特異引物,採用RACE技術成功剋隆穫得赤點石斑魚HSP60 cDNA全序列及基因組全序列.其cDNA序列全長2 351 bp,包括75 bp的5'UTR,539 bp的3'UTR和1 737 bp的開放閱讀框,共編碼578箇氨基痠.覈苷痠及氨基痠序列比對結果顯示該基因與其他脊椎動物的相似性很高.基于氨基痠序列構建的繫統進化樹與傳統物種樹基本吻閤,說明HSP60可能是1箇潛在的可用于物種繫統進化研究的良好標記.所穫得的赤點石斑魚HSP60基因組全序列含有8箇內含子和9箇外顯子,也與已知其他硬骨魚類基本一緻.這種在序列特徵、蛋白空間結構及基因組結構上的高度保守性意味著HSP60在動物生命活動中可能髮揮著至關重要的作用.通過實時PCR檢測結果髮現HSP60在赤點石斑魚各組織中均有錶達,而攻毒後魚體肝的錶達量顯著增高(P<0.05),鰓、脾、胃和腦等重要組織器官的錶達量也有不同程度的提高,該結果證實瞭HSP60基因在魚類非特異性免疫應答中髮揮瞭作用.
HSP60(heat shock protein 60,열휴극단백60)작위고도보수적열휴극단백가족적일원,불부가이재응격상태하방조기타단백정학절첩병회복천연구상,환가작위위험신호작용우천연면역계통.기우HSP60적EST서렬설계특이인물,채용RACE기술성공극륭획득적점석반어HSP60 cDNA전서렬급기인조전서렬.기cDNA서렬전장2 351 bp,포괄75 bp적5'UTR,539 bp적3'UTR화1 737 bp적개방열독광,공편마578개안기산.핵감산급안기산서렬비대결과현시해기인여기타척추동물적상사성흔고.기우안기산서렬구건적계통진화수여전통물충수기본문합,설명HSP60가능시1개잠재적가용우물충계통진화연구적량호표기.소획득적적점석반어HSP60기인조전서렬함유8개내함자화9개외현자,야여이지기타경골어류기본일치.저충재서렬특정、단백공간결구급기인조결구상적고도보수성의미착HSP60재동물생명활동중가능발휘착지관중요적작용.통과실시PCR검측결과발현HSP60재적점석반어각조직중균유표체,이공독후어체간적표체량현저증고(P<0.05),새、비、위화뇌등중요조직기관적표체량야유불동정도적제고,해결과증실료HSP60기인재어류비특이성면역응답중발휘료작용.