啤酒科技
啤酒科技
비주과기
BEER SCIENCE AND TECHNOLOGY
2011年
5期
61-65
,共5页
杜元正%金昭%张波%陆健
杜元正%金昭%張波%陸健
두원정%금소%장파%륙건
糖基化%辅助基质激光电离/解吸飞行时间串联质谱(MALDI TOF/TOF MS)%麦芽%蛋白质
糖基化%輔助基質激光電離/解吸飛行時間串聯質譜(MALDI TOF/TOF MS)%麥芽%蛋白質
당기화%보조기질격광전리/해흡비행시간천련질보(MALDI TOF/TOF MS)%맥아%단백질
糖基化是蛋白质非酶修饰的一种常见形式.尽管食品中蛋白质的糖基化许多年前已为大家所知,对糖基化产物的定性与定量分析仍然是一项富有挑战性的工作.本文研究了大麦蛋白质Z的糖基化作用.大麦麦芽中的蛋白质Z是影响啤酒成分的最重要蛋白质之一.本实验通过凝胶电泳,液相色谱和质谱的联用对制麦时期的这一修饰过程进行了研究.在制麦的不同阶段于大麦谷粒中提取水溶性蛋白,进而利用凝胶电泳方法分离,大麦蛋白质Z的条带清晰的出现在43KDa处.再进行基于辅助基质激光解吸技术的质谱分析,研究发现在制麦的第二天就可以检测到蛋白质Z的糖基化,糖基化后的多肽在质谱中m/z为2619.为了验证糖基化的影响,又进行了串联质谱实验(MS/MS),同时检测到了未修饰的多肽(m/z为2457)和已修饰的多肽(m/z为2619).本研究成功的建立了一种监控制麦过程的方法,该方法利用质谱分析技术,以蛋白质Z为标准参照物,对糖基化多肽进行监控.研究证实了利用串联质谱分析的可行性,通过该方法可以获得更多多肽修饰方面的信息.
糖基化是蛋白質非酶脩飾的一種常見形式.儘管食品中蛋白質的糖基化許多年前已為大傢所知,對糖基化產物的定性與定量分析仍然是一項富有挑戰性的工作.本文研究瞭大麥蛋白質Z的糖基化作用.大麥麥芽中的蛋白質Z是影響啤酒成分的最重要蛋白質之一.本實驗通過凝膠電泳,液相色譜和質譜的聯用對製麥時期的這一脩飾過程進行瞭研究.在製麥的不同階段于大麥穀粒中提取水溶性蛋白,進而利用凝膠電泳方法分離,大麥蛋白質Z的條帶清晰的齣現在43KDa處.再進行基于輔助基質激光解吸技術的質譜分析,研究髮現在製麥的第二天就可以檢測到蛋白質Z的糖基化,糖基化後的多肽在質譜中m/z為2619.為瞭驗證糖基化的影響,又進行瞭串聯質譜實驗(MS/MS),同時檢測到瞭未脩飾的多肽(m/z為2457)和已脩飾的多肽(m/z為2619).本研究成功的建立瞭一種鑑控製麥過程的方法,該方法利用質譜分析技術,以蛋白質Z為標準參照物,對糖基化多肽進行鑑控.研究證實瞭利用串聯質譜分析的可行性,通過該方法可以穫得更多多肽脩飾方麵的信息.
당기화시단백질비매수식적일충상견형식.진관식품중단백질적당기화허다년전이위대가소지,대당기화산물적정성여정량분석잉연시일항부유도전성적공작.본문연구료대맥단백질Z적당기화작용.대맥맥아중적단백질Z시영향비주성분적최중요단백질지일.본실험통과응효전영,액상색보화질보적련용대제맥시기적저일수식과정진행료연구.재제맥적불동계단우대맥곡립중제취수용성단백,진이이용응효전영방법분리,대맥단백질Z적조대청석적출현재43KDa처.재진행기우보조기질격광해흡기술적질보분석,연구발현재제맥적제이천취가이검측도단백질Z적당기화,당기화후적다태재질보중m/z위2619.위료험증당기화적영향,우진행료천련질보실험(MS/MS),동시검측도료미수식적다태(m/z위2457)화이수식적다태(m/z위2619).본연구성공적건립료일충감공제맥과정적방법,해방법이용질보분석기술,이단백질Z위표준삼조물,대당기화다태진행감공.연구증실료이용천련질보분석적가행성,통과해방법가이획득경다다태수식방면적신식.