南昌大学学报（理科版）
南昌大學學報（理科版）
남창대학학보（이과판）
JOURNAL OF NANCHANG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2011年
5期
457-463
,共7页
褶纹冠蚌、热休克%HSP70、表达%嗜水气单胞菌
褶紋冠蚌、熱休剋%HSP70、錶達%嗜水氣單胞菌
습문관방、열휴극%HSP70、표체%기수기단포균
运用兼并引物结合RT-PCR方法从褶纹冠蚌(Cristaria plicata)血细胞中克隆出热休克蛋白70(HSP70)的cDNA序列.用半定量PCR方法研究了HSP70 mRNA在褶纹冠蚌不同组织的表达情况.结果表明:HSP70cDNA全长为2664 bp,5’非编码区364个核苷酸,3’非编码区383个核苷酸,开放阅读框为1917 bp,编码638个氨基酸组成的蛋白质,该蛋白理论等电点为5.61,分子量为70.3 kD.HSP70基因不含内含子.氨基酸序列分析发现,推导的氨基酸序列含有HSP70家族的3个标签序列(I10 DLGTTYS17,V198 FDLGGGTFDVSIL211和V336VLVGGSTRIPKV QK350).氨基酸序列同源性比较显示HSP70与紫贻贝(Mytihcs galloprovincialis)和美洲牡蛎(Crassostrea virginica)氨基酸序列同源性分别为79.47％和77％.半定量PCR分析显示在正常褶纹冠蚌血液、外套膜、鳃、闭壳肌和肝胰腺5种组织中均能检测到HSP70的基因表达.经过热休克或病原菌刺激后,蚌各组织中HSP70 mRNA的表达显著增加,其中热休克处理后,蚌的鳃和血液中HSP70 mRNA表达量增加最为显著；而嗜水气单胞菌刺激后蚌的肌肉和鳃组织中HSP70 mRNA表达量增加最明显.
運用兼併引物結閤RT-PCR方法從褶紋冠蚌(Cristaria plicata)血細胞中剋隆齣熱休剋蛋白70(HSP70)的cDNA序列.用半定量PCR方法研究瞭HSP70 mRNA在褶紋冠蚌不同組織的錶達情況.結果錶明:HSP70cDNA全長為2664 bp,5’非編碼區364箇覈苷痠,3’非編碼區383箇覈苷痠,開放閱讀框為1917 bp,編碼638箇氨基痠組成的蛋白質,該蛋白理論等電點為5.61,分子量為70.3 kD.HSP70基因不含內含子.氨基痠序列分析髮現,推導的氨基痠序列含有HSP70傢族的3箇標籤序列(I10 DLGTTYS17,V198 FDLGGGTFDVSIL211和V336VLVGGSTRIPKV QK350).氨基痠序列同源性比較顯示HSP70與紫貽貝(Mytihcs galloprovincialis)和美洲牡蠣(Crassostrea virginica)氨基痠序列同源性分彆為79.47％和77％.半定量PCR分析顯示在正常褶紋冠蚌血液、外套膜、鰓、閉殼肌和肝胰腺5種組織中均能檢測到HSP70的基因錶達.經過熱休剋或病原菌刺激後,蚌各組織中HSP70 mRNA的錶達顯著增加,其中熱休剋處理後,蚌的鰓和血液中HSP70 mRNA錶達量增加最為顯著；而嗜水氣單胞菌刺激後蚌的肌肉和鰓組織中HSP70 mRNA錶達量增加最明顯.
운용겸병인물결합RT-PCR방법종습문관방(Cristaria plicata)혈세포중극륭출열휴극단백70(HSP70)적cDNA서렬.용반정량PCR방법연구료HSP70 mRNA재습문관방불동조직적표체정황.결과표명:HSP70cDNA전장위2664 bp,5’비편마구364개핵감산,3’비편마구383개핵감산,개방열독광위1917 bp,편마638개안기산조성적단백질,해단백이론등전점위5.61,분자량위70.3 kD.HSP70기인불함내함자.안기산서렬분석발현,추도적안기산서렬함유HSP70가족적3개표첨서렬(I10 DLGTTYS17,V198 FDLGGGTFDVSIL211화V336VLVGGSTRIPKV QK350).안기산서렬동원성비교현시HSP70여자이패(Mytihcs galloprovincialis)화미주모려(Crassostrea virginica)안기산서렬동원성분별위79.47％화77％.반정량PCR분석현시재정상습문관방혈액、외투막、새、폐각기화간이선5충조직중균능검측도HSP70적기인표체.경과열휴극혹병원균자격후,방각조직중HSP70 mRNA적표체현저증가,기중열휴극처리후,방적새화혈액중HSP70 mRNA표체량증가최위현저；이기수기단포균자격후방적기육화새조직중HSP70 mRNA표체량증가최명현.
